多重PCR法在食品中致泻大肠埃希氏菌质控考核中的应用
肉汤,微生物学,引言,材料与方法,1样品,2试剂及仪器,3试验方法,结果与分析,1平板分离结果结果如下,2可疑菌落生化鉴定结果如下,3可疑菌落PCR确证试验结果如下,讨论与分析
1.引言大肠埃希氏菌俗称大肠杆菌,是人类和动物的肠道中重要的正常菌群,为宿主提供一些有营养作用的合成代谢产物。多数大肠埃希氏菌并不致病,当机体抵抗力下降或侵入肠外组织或器官时,可作为条件致病菌而引起肠道外的感染,引起胃肠炎的大肠埃希氏菌分为五类即肠致病性大肠埃希氏菌(EPEC)、肠产肠毒素大肠埃希氏菌(ETEC)、肠侵袭性大肠埃希氏菌(EⅠEC)、肠出血性大肠埃希氏菌(EHEC)和粘附性肠埃希氏菌(EAEC)[1]。快速检测和鉴定病原菌是及时有效地控制与预防传染病传播的重要手段。传统的微生物学分离与鉴定以及血清学方法在鉴别与鉴定病原微生物方面日益显现出不足。PCR法快速、敏感、特异,是对病原菌快速鉴别与分型的重要技术之一,而多重PCR更以其突出的优越性得到了广泛的应用[2]。
2.材料与方法
2.1 样品
样品编号为15-1, 15-2,每份考核样品包含西林瓶1个,西林瓶中装有白色冻干菌球。本次考核共计2份样品。
2.2 试剂及仪器
营养肉汤、肠道菌增菌肉汤、麦康凯琼脂(MAC)、伊红美蓝琼脂(EMB)、三糖铁(TSⅠ)琼脂、大肠埃希氏菌生化套盒、无菌双蒸水 ......
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