食品中的致病微生物沙门氏菌的商业化检测技术
微孔,孵育,1实时荧光PCR方法(RT-PCR),1应用原理,2具体操作流程,3检测优势,2酶联免疫吸附技术(ELISA),3传统的微生物培养法,4总结
□ 贺丽丽 拜发分析系统销售(北京)有限公司
沙门氏菌是食品中常见的致病菌,也是引起食物中毒的重要病原菌之一,其会严重危害人们的食品安全与身体健康。据统计,在全球记载的细菌性食物中毒事件中,因沙门氏菌而引起的食物中毒常列榜首。
沙门氏菌疾病是公共卫生学上具有重要意义的人畜共患病之一,其病原菌——沙门氏菌属肠道细菌科,包含多种能引起食物中毒及导致胃肠炎、伤寒和副伤寒的细菌。沙门氏菌在粪便、土壤、食品和水中可存活5个月至2年之久,除可感染人体外,其还可感染哺乳类、鸟类、爬行类、鱼类、两栖类及昆虫等动物。人/畜感染沙门氏菌后可呈现无症状带菌状态,也可表现为有临床症状的致死疾病——加重病态或提高死亡率,亦或降低动物的繁殖能力。
家禽、蛋类和肉类产品是沙门氏菌的主要传播媒介,而受感染程度主要取决于沙门氏菌的血清类型和食用者的身体状况,因此,小孩、老年人及免疫缺陷的个体是较容易受到该菌威胁的群体。根据国际惯例,要求对易受沙门氏菌污染的食品进行检测,并分类管理,以保证消费者接触到的食物不含沙门氏菌,从而有效预防疾病。我国《食品安全法》规定,食品中沙门氏菌的限量标准为0,并要求食品在进入市场之前一定要检测是否含有沙门氏菌。然而,传统的细菌学检测方法繁琐耗时,不能满足如今食品安全检测快速发展的需求。本文介绍了德国拜发集团(以下简称“拜发”)在食品中沙门氏菌检测方面研发的3种检测方法,以期为相关人员进行日常检测提供参考。
1 实时荧光PCR方法(RT-PCR)
1.1 应用原理
RT-PCR(Real time-PCR)是在传统PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的积累实时检测整个PCR进程,最后通过软件分析其积累的荧光信号,进而对需要检测的基因序列进行定性或定量分析 ......
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