食品微生物实验室质量控制的研究与实践(1)
质量控制是实验室检測工作的重要环节，其在微生物检测过程中显得尤为重要。实验室操作人员在日常工作中除了要严格遵守相关的管理制度和规范化的操作流程外，更应对影响实验室检测的重要因素及环节进行严格的控制和管理。本文以实际经验为依据，主要从人员管理、设备管理、培养基管理、关键耗材控制、标准菌株及环境监控等方面对食品微生物实验室的质量控制措施进行研究和实践，并总结出关键注意事项。
1 人员管理
1.1 人员能力要求
实验室人员主要分为管理人员、技术人员、技术支持人员等，相应岗位的人员应具备相应的技术能力，以及相应的技术能力证明(证书或证件)。微生物检验室应由具备相应技术能力的人员负责室内的技术工作，并设立质量监督员。
检测人员的水平直接关系和影响实验室的检验能力，因此，检验人员必须具备较强的技术能力和责任心。食品微生物检验人员应具备一定的微生物检验资质或相关专业素养，即能正确实施检验操作并对结果进行判读。其中，有视觉障碍的人员不能执行涉及辨色的实验工作，因为微生物检测中的许多生化试验等需要根据颜色进行结果判定。
1.2 培训与考核
实验室管理层应保证所有人员都接受过必要的培训，包括微生物检测技能方面的培训、实验室生物安全方面的培训、设备操作维护方面的培训等，从而保证相关人员能熟练准确的操作及掌握消毒知识和生物安全操作，避免人为污染样品的同时有效保证自身安全。除此之外，还应制定关于检测人员的继续教育培训计划，配套进行适当的考核计划，即通过人员比对、内部比对、盲样考核、使用购买的质控样品等方式对人员技术能力等进行考核，以保证检验人员技术水平和各方面素质的持续有效提高。
2 设备管理
2.1 微生物实验室主要设备
实验室的设备是质量控制的关键环节之一，也是实验室检测数值准确性的保证，故实验室应配备满足工作要求的检测设备。微生物实验室常用的仪器设备包括高压灭菌器、生物安全柜、超净工作台、培养箱、水浴锅、冰箱、显微镜等必备设备，以及微生物测定仪器、微生物检定仪器、空气采样器、酶标仪、PCR仪等专用设备。
2.2 设备的要求和管理
检测设备的存放、使用、维护、保养等管理应严格按照规定程序进行，并定期做好检定/校准及期间核查以保证其性能满足检验要求。为了避免微生物实验室中出现交叉感染的情况，仪器设备尽量不要频繁移动，若必须移动或维修，应在移动或维修后进行检定/校准或核查其性能是否可以满足工作需要后再使用。仪器设备使用过程中应定期进行监控，如发现异常或故障，应立即停止使用并核查是否已对之前的检测结果造成影响。使用自动化设备进行数据采集、处理、存储等，应防止数据被篡改或破坏的风险，并防止非授权人员使用。
此外，实验室所使用的高压灭菌器若为特种设备，检测人员则要具备特种设备操作证书方可进行操作。日常监控可定期使用灭菌胶带、灭菌指示卡及生物指示物监控高压灭菌器的灭菌效果，并定期核查压力表和安全阀的性能。如果是温度对检测结果有重要影响的设备，如培养箱、水浴锅、冰箱等，要通过校准正确的引入校正因子，并定期监控设备的温度变化。生物安全柜、超净台需要定期核查过滤系统、风速等指标性能是否满足检验要求。
3 培养基管理
3.1 培养基的采购与验收
实验室购买和使用培养基时要严格依照《食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求》(GB 4789.28-2013)进行验证，可选择国内外知名大品牌且质量和信誉度较好的厂商购进，并向供应商索要验收合格报告及厂家资质证明等。
按照GB 4789.28-2013的要求使用标准菌株进行选择性、生长率、特异性等技术验收。培养基开启后要记录启用日期，并按说明书的要求条件进行存放，因为有些培养基开启后需要冷藏保存，如SC培养基。
3.2 培养基配制和使用注意事项
正确制备培养基是微生物检验的基础工作之一。培养基在配制称量时，为防止吸入含有有毒物质的培养基粉末，操作人员应佩戴口罩或在通风柜中进行。将配置好的培养基分装到适当的容器中，其分装量需按要求进行分装，不得超过容器的2/3，避免灭菌时溢出。包扎灭菌时，盛装培养基容器的塞子必须塞紧，以免因塞子松动或脱落而造成污染。配制好的培养基应按说明书的要求进行灭菌，包括煮沸灭菌、湿热灭菌、过滤除菌等方法，具体按检验标准中的规定进行灭菌。脱水培养基在分装或灭菌前均应完全溶解于水中。由于所有的培养基或多或少都对热具有一定的敏感性，因此培养基在加热助溶时切忌过度加热，否则会使培养基的颜色变深，甚至影响培养基的质量。灭菌效果的控制是微生物检验者面临的关键问题之一，故应对灭菌的效果进行验证——通常采用灭菌指示胶带或嗜热脂肪芽孢杆菌进行，验证时需按各自说明书的要求进行操作。
固体培养基灭菌后再融化，可使用微波炉或流体蒸汽进行，且只允许融化一次。融化后的培养基应尽快使用，放置时间一般不超过4h，未用完的培养基不能重新凝固留待下次使用。此外，商品化的即用型培养基应按照厂商提供的说明书指示进行使用和存放，超过有效期的培养基不得使用。
4 关键耗材管理
关键耗材一般指会对检测结果造成影响的试剂耗材。食品微生物实验室常用的关键耗材主要包括无菌培养皿、无菌吸管或吸头、涂布棒、接种环、接种针等。对于关键试剂耗材，应选择资质满足要求的供应商进行采购，且要对其进行严格的质量控制。
4.1 关键耗材的符合性检验
符合性检验通常指感官检验，即收到耗材后仔细核查耗材的供应商、生产单位、产品名称、规格/型号、数量、生产日期、生产批号、灭菌日期、有效期等信息，并检查耗材包装是否完整。
4.2 关键耗材的技术性检验, http://www.100md.com(付敏 陶文靖 赵婷婷)
1 人员管理
1.1 人员能力要求
实验室人员主要分为管理人员、技术人员、技术支持人员等，相应岗位的人员应具备相应的技术能力，以及相应的技术能力证明(证书或证件)。微生物检验室应由具备相应技术能力的人员负责室内的技术工作，并设立质量监督员。
检测人员的水平直接关系和影响实验室的检验能力，因此，检验人员必须具备较强的技术能力和责任心。食品微生物检验人员应具备一定的微生物检验资质或相关专业素养，即能正确实施检验操作并对结果进行判读。其中，有视觉障碍的人员不能执行涉及辨色的实验工作，因为微生物检测中的许多生化试验等需要根据颜色进行结果判定。
1.2 培训与考核
实验室管理层应保证所有人员都接受过必要的培训，包括微生物检测技能方面的培训、实验室生物安全方面的培训、设备操作维护方面的培训等，从而保证相关人员能熟练准确的操作及掌握消毒知识和生物安全操作，避免人为污染样品的同时有效保证自身安全。除此之外，还应制定关于检测人员的继续教育培训计划，配套进行适当的考核计划，即通过人员比对、内部比对、盲样考核、使用购买的质控样品等方式对人员技术能力等进行考核，以保证检验人员技术水平和各方面素质的持续有效提高。
2 设备管理
2.1 微生物实验室主要设备
实验室的设备是质量控制的关键环节之一，也是实验室检测数值准确性的保证，故实验室应配备满足工作要求的检测设备。微生物实验室常用的仪器设备包括高压灭菌器、生物安全柜、超净工作台、培养箱、水浴锅、冰箱、显微镜等必备设备，以及微生物测定仪器、微生物检定仪器、空气采样器、酶标仪、PCR仪等专用设备。
2.2 设备的要求和管理
检测设备的存放、使用、维护、保养等管理应严格按照规定程序进行，并定期做好检定/校准及期间核查以保证其性能满足检验要求。为了避免微生物实验室中出现交叉感染的情况，仪器设备尽量不要频繁移动，若必须移动或维修，应在移动或维修后进行检定/校准或核查其性能是否可以满足工作需要后再使用。仪器设备使用过程中应定期进行监控，如发现异常或故障，应立即停止使用并核查是否已对之前的检测结果造成影响。使用自动化设备进行数据采集、处理、存储等，应防止数据被篡改或破坏的风险，并防止非授权人员使用。
此外，实验室所使用的高压灭菌器若为特种设备，检测人员则要具备特种设备操作证书方可进行操作。日常监控可定期使用灭菌胶带、灭菌指示卡及生物指示物监控高压灭菌器的灭菌效果，并定期核查压力表和安全阀的性能。如果是温度对检测结果有重要影响的设备，如培养箱、水浴锅、冰箱等，要通过校准正确的引入校正因子，并定期监控设备的温度变化。生物安全柜、超净台需要定期核查过滤系统、风速等指标性能是否满足检验要求。
3 培养基管理
3.1 培养基的采购与验收
实验室购买和使用培养基时要严格依照《食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求》(GB 4789.28-2013)进行验证，可选择国内外知名大品牌且质量和信誉度较好的厂商购进，并向供应商索要验收合格报告及厂家资质证明等。
按照GB 4789.28-2013的要求使用标准菌株进行选择性、生长率、特异性等技术验收。培养基开启后要记录启用日期，并按说明书的要求条件进行存放，因为有些培养基开启后需要冷藏保存，如SC培养基。
3.2 培养基配制和使用注意事项
正确制备培养基是微生物检验的基础工作之一。培养基在配制称量时，为防止吸入含有有毒物质的培养基粉末，操作人员应佩戴口罩或在通风柜中进行。将配置好的培养基分装到适当的容器中，其分装量需按要求进行分装，不得超过容器的2/3，避免灭菌时溢出。包扎灭菌时，盛装培养基容器的塞子必须塞紧，以免因塞子松动或脱落而造成污染。配制好的培养基应按说明书的要求进行灭菌，包括煮沸灭菌、湿热灭菌、过滤除菌等方法，具体按检验标准中的规定进行灭菌。脱水培养基在分装或灭菌前均应完全溶解于水中。由于所有的培养基或多或少都对热具有一定的敏感性，因此培养基在加热助溶时切忌过度加热，否则会使培养基的颜色变深，甚至影响培养基的质量。灭菌效果的控制是微生物检验者面临的关键问题之一，故应对灭菌的效果进行验证——通常采用灭菌指示胶带或嗜热脂肪芽孢杆菌进行，验证时需按各自说明书的要求进行操作。
固体培养基灭菌后再融化，可使用微波炉或流体蒸汽进行，且只允许融化一次。融化后的培养基应尽快使用，放置时间一般不超过4h，未用完的培养基不能重新凝固留待下次使用。此外，商品化的即用型培养基应按照厂商提供的说明书指示进行使用和存放，超过有效期的培养基不得使用。
4 关键耗材管理
关键耗材一般指会对检测结果造成影响的试剂耗材。食品微生物实验室常用的关键耗材主要包括无菌培养皿、无菌吸管或吸头、涂布棒、接种环、接种针等。对于关键试剂耗材，应选择资质满足要求的供应商进行采购，且要对其进行严格的质量控制。
4.1 关键耗材的符合性检验
符合性检验通常指感官检验，即收到耗材后仔细核查耗材的供应商、生产单位、产品名称、规格/型号、数量、生产日期、生产批号、灭菌日期、有效期等信息，并检查耗材包装是否完整。
4.2 关键耗材的技术性检验, http://www.100md.com(付敏 陶文靖 赵婷婷)