一种基于ATP荧光反应的洁净度检测系统的开发与验证
柳江山 陶文靖 曲连海


摘 要:本文旨在建立一种基于ATP荧光反应的洁净度检测系统,并对该系统的主要性能指标进行验证,包括线性、重复性、检出限及衰减率等,并对检测结果进行分析。结果显示,本拭子对ATP标准溶液的检出限为1.77×10-15mol/L,线性良好;对菌液的检出结果为:大肠埃希氏菌检出限2000CFU、金黄色葡萄球菌检出限800CFU、酵母菌检出限10CFU,均线性良好。该系统重复性良好,在高浓度ATP下,相对标准偏差(RSD)为8%;在低浓度ATP下,相对标准偏差为13%,均小于15%;在6min内,荧光衰减率无明显变化。故得出结论,本拭子的灵敏度、线性、重复性和衰减率指标均较好。
关键词:三磷酸腺苷? ATP荧光? 洁净度? 验证
随着目前国内对于食品安全的重视程度越来越高,食品微生物检测技术也在不断革新。传统的食品微生物检测方法一般为平板计数法,但该方法步骤繁琐,包括培养基制备、灭菌、样品均质与稀释、制备平板、恒温培养等多项操作,耗时至少2天,费时费力,已无法满足食品企业对于生产环境监测和质量控制的需求。此时,ATP荧光技术作为一种新的检测技术提供了新的设计思路——通过对细胞中的ATP进行检测,能够在短时间内估算被测物体上残留的微生物大致数量,从而实现对食品企业生产环境的快速检测,且能快速报告结果,在大大缩短检测时间的同时节省了人力与物力。
ATP又称腺嘌呤核苷三磷酸(简称“三磷酸腺苷”),是一种不稳定的高能化合物,由1分子腺嘌呤、1分子核糖和3分子磷酸基团组成。ATP是生物体内最直接的能量来源,其在细胞中能通过与ADP的相互转化实现贮能和放能,从而保证细胞各项生命活动的能量供应 ......
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