食品危害物适配体截短优化及其应用研究进展
靶标,核酸,1食品危害物核酸适配体序列优化现状,2食品危害物核酸适配体序列优化方法,1截短优化,2裂分优化,3突变优化,3食品危害物截短核酸适配体生物传感器应用,1荧光适配体传感器,2比色适配体传感器,3电化学适配体传
梁 好,徐学明(江南大学食品学院,江苏无锡 214000)
食源性疾病是当前食品安全面临的重大问题,已成为全球性公共卫生问题之一。据有关数据统计,全世界范围内每年有数十亿人患有食源性疾病,其中,我国每年发生食源性疾病人数近千万人次[1]。因此,对食品危害物进行快速、灵敏检测,对降低食源性疾病发生率、提高国民身体健康度及维护国家社会稳定性具有非常重要的作用。
目前,常见的食品危害物检测方法主要有仪器分析法、免疫分析法、平板分离法等。其中,仪器分析法包括气相色谱法、高效液相色谱法等,这类方法具有精密度高、重复性好的优点,但所用仪器昂贵、样品前处理复杂;免疫分析法包括酶联免疫吸附法、荧光免疫测定法等,但由于抗体制备成本高、重复性差,现场检测的运用受到限制;平板分离法主要用于致病菌的检测,结果稳定性较好,但检测周期较长,一般需要3~5 d[2]。
20世纪90年代发现的核酸适配体分子探针给食品危害物的检测带来了新的机遇。核酸适配体(Aptamer)又称“化学抗体”,是一种能折叠成特定三维结构并特异性结合靶标分子的单链DNA或RNA,一般长度在20~100个碱基之间[3]。它可以通过指数富集的配体系统进化技术(Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment,SELEX)从体外筛选获得,目前很多致病菌、真菌毒素、重金属离子等食品危害物的核酸适配体均已有报道。此外,目前很多体外筛选获得的核酸适配体序列初始长度为80 bp左右[4],随着人们对核酸适配体研究的深入,越来越多的研究表明,对核酸适配体序列进行截短、裂分优化后,其仍然保有原有的功能性质,甚至识别性能更优越[5]。与此同时,通过序列优化还可以进一步揭示核酸适配体序列结构与功能之间的关系,有利于理解核酸适配体-靶标作用机制。因此,核酸适配体的序列优化及作用机制等方面的研究已逐渐成为研究热点。本文主要总结了近年来已报道的食品危害物核酸适配体的序列优化及其应用情况 ......
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