探讨高效液相色谱法测定海水鱼中嘌呤含量
次黄嘌呤,鲈鱼,1材料与方法,1原料,2仪器和试剂,3实验方法,2结果与分析,1标准曲线,2精密度,3加标回收率,4嘌呤含量测定结果,3结论
严玮桐(九江市检验检测认证中心食品分中心,江西九江 332000)
1 材料与方法
1.1 原料
本次试验所用的海水鱼,选择新鲜的海鲈鱼、黄花鱼、鳕鱼3种鱼类,均购置某水产市场。
1.2 仪器和试剂
电子天平、HPLC仪、pH计、紫外-可见分光光度计、超声清洗器、冷冻高速离心机、真空旋转蒸发仪、绞肉机、电热恒温水槽和超纯水系统等。
色谱级的腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌呤、黄嘌呤,纯度均>99%;色谱纯甲醇、四丁基氢氧化铵、冰乙酸、三氟乙酸;分析纯甲酸、高氯酸等。
1.3 实验方法
1.3.1 色谱条件
(1)流动相。参考曲欣[1]的研究,色谱柱:Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18,4.6 mm×250 mm,5 μm;流动相:水-甲醇-冰乙酸-20%四丁基氢氧化铵,体积比:879∶100∶15∶6;柱温:30 ℃,流速:1 mL/min,进样量:10 μL,检测波长:254 nm。在此基础上进行优化,确定最佳流速和检测波长。
(2)流速。流动相确定后,选择3种流速分离嘌呤, 分 别 是 0.8 mL/min、1 mL/min、1.2 mL/min ......
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