不同方法提取鲫鱼鱼皮胶原蛋白的比较研究
羟脯氨酸,酶法,1材料与方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3方法,2结果与分析,1羟脯氨酸标准曲线,2单因素实验结果,3结论与讨论
鲜雪梅,冯 冲,郭雨慧,王 茜(阿坝师范学院资源与环境学院,四川汶川 623002)
胶原蛋白是动物体内含量丰富、分布广泛的一种糖蛋白,约占动物机体内总蛋白含量的25%~30%,具有良好的生理特性和活性[1]。胶原蛋白在食品[2]、医药[3]、化妆品[4-5]等领域都具有较大的应用价值。常见的胶原蛋白来源主要为猪、牛等陆生动物,但因疯牛病、口蹄疫等动物传染性疾病的潜在威胁,人们对这些动物来源的胶原蛋白有一定的顾虑[6]。研究发现,鱼皮中含有丰富的蛋白质,其含量高于机体其他部位,胶原蛋白质的含量达到总蛋白质含量的80%以上[7]。鱼皮可作为胶原蛋白的潜在可靠来源,以满足胶原蛋白市场的巨大需求。
目前提取鱼皮胶原蛋白的方式主要有4类,分别是热水浸提、酸法提取、碱法提取和酶法浸提[8]。水提取法是常见的提取鱼皮胶原蛋白的方法,其机制是用温水进行温浸,再回流,最后通过高压蒸煮从鱼皮中获得胶原蛋白[9]。赵睿等[10]用热水进行了鳕鱼皮胶原蛋白的提取,采用响应面法得到的最大提取率为43.75%。JAMILAH等[11]用水提法提取黑、红罗非鱼皮胶原蛋白,提取率仅为5.39%和7.81%。水提取法对实验的操作能力要求较高,且高温下胶原蛋白易变性,因此不建议使用该方法[9]。酸提取法的原理是鱼皮中的各种相关成分在酸性环境下溶解度不同,在一定的条件下可通过酸性试剂提取分离,常使用的酸性提取试剂有乳酸、乙酸、盐酸和柠檬酸等[9]。王晴等[12]用乙酸提取罗非鱼鱼皮的胶原蛋白,得率为3.12%。傅燕凤等[13]使用酸性试剂(醋酸、柠檬酸、乳酸)分别提取了鲢鱼、鳙鱼和草鱼3种鱼皮中的胶原蛋白,提取率分别是20.0%、21.1%、25.5%。酸提取法法对实验操作能力要求较高,时间也较长,在大量消耗原材料的情况下,得到的提取率并不高[9]。碱提取法提取鱼皮胶原蛋白的机制是把鱼皮进行破碎匀浆后,加入一定浓度的碱性试剂振荡,过滤沉淀后,再进行高速离心操作,最后冷冻干燥得到产物[8]。用碱性试剂提取胶原蛋白质的文献资料较少,很多是与其他提取方式结合共同提取。KOLODZIEJSKA等[14]用氢氧化钠和过氧化氢进行鱿鱼皮胶原蛋白的提取,提取率为53%。温慧芳等[15]用氢氧化钙提取鮰鱼皮胶原蛋白,最佳提取率为79.67%。碱性提取法操作步骤简单,但此种方法会抑制胶原蛋白的活性,且产生的废液也要妥善处理才不会污染自然环境[16]。酶提取法具有破坏性小、提取率高,对环境友好等优点,且得到的胶原蛋白具有活性。酶在特定的反应条件下会对胶原蛋白产生限制性降解作用 ......
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