食品中沙门氏菌缓冲蛋白胨水培养基的优化
浸膏,食源性,致病菌,1材料与方法,1菌株来源,2试剂与仪器设备,3实验方法,2结果与分析,1生长曲线测定结果,2平板计数测定的验证结果,3沙门氏菌第8h和第18hOD550值的比较,4缓冲蛋白胨水培养基中酵母浸膏添加量
王 乐,陈 佳,秦 丽(1.张家口市食品药品检验中心,河北张家口 075000;2.石家庄学院化工学院,河北石家庄 050035;3.河北省知识产权保护中心,河北石家庄 050000)
沙门氏菌(Salmonella)是一种最常见的、能引起人畜共患病的食源性致病菌,在人和动物体中有广泛的寄主[1]。我国由沙门氏菌引起的食源性疾病居细菌性食源性疾病的首位[2]。在消费者食用被沙门氏菌污染的食物后,会出现腹泻、肠胃炎、发热和败血症等一系列症状[3]。
近年来,随着生活水平的提高,人们对食品安全问题的重视日益增加。食品中富含各种营养物质,是食源性致病菌生长、繁殖的良好基质,而且食品在加工、包装、配送及储存等过程中也极易受到食源性致病菌污染[4]。因此,加强对食品中食源性致病菌的检测就显得十分重要。据世界卫生组织统计,沙门氏菌在食源性致病菌中排名第一,世界各国对于食品中沙门氏菌的检测要求都十分严格,沙门氏菌污染一直是食品行业检测的重要指标之一[5]。
目前,沙门氏菌的检测方法主要有传统培养方法、免疫学方法和PCR法[6-8]。随着科学技术的发展,多重PCR法、实时荧光PCR法、侧向流动检测法等一系列新方法也逐步开始应用于食品中沙门氏菌的检验[9-11]。但传统培养方法和现代检测技术都必须以目标菌的富集为前提,从而进行后续的检测[12]。前增菌过程可以实现目标菌的富集,是缩短增菌时间、降低背景干扰的有效手段[13]。沙门氏菌现行国家标准方法的前增菌是采用缓冲蛋白胨水培养基使样品中菌体恢复并大量增殖的过程,此步骤对后续检出率的影响至关重要,但其所需的检测时间较长[14]。因此,本研究以缓冲蛋白胨水培养基为基础,通过酵母添加量的优化,以期得到一种快速、特异性强的培养基,从而缩短前增菌时间,为我国食品安全的风险监测提供技术支持。
1 材料与方法
1.1 菌株来源
实验所用的鼠伤寒沙门氏菌(CMCC50976)购于中国医学细菌保藏管理中心。
1.2 试剂与仪器设备
酵母浸膏(Becton,Dickinson and Company);磷酸盐缓冲液、营养琼脂、缓冲蛋白胨水、平板计数琼脂(北京路桥技术股份有限公司);细菌基因组DNA提取试剂盒、2×PCR Master Mix(天根生化科技北京有限公司);引物及探针(生工生物工程上海股份有限公司) ......
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