王 华，刘虹虹，罗达龙

    (梧州市食品药品检验所，广西梧州 543000)

    蜂蜜中富含糖类、维生素、氨基酸和多种矿物质等，蜂蜜具有护肝、润肺、增强人体免疫的功能[1]。蜂蜜不仅作为一种营养食品，因其具有一定的药理作用，也被称作医家良药，在临床上用于消化系统、创伤治疗等疾病的治疗[2-3]。因此蜂蜜也成了消费者追捧的产品，在蜂业养殖中为避免蜂群受到疾病感染，会出现抗生素滥用的情况。塞克硝唑、甲硝唑、替硝唑、奥硝唑为《中国药典》2020年版收录的4个具有5-硝基咪唑基本结构的药物，该药物具有抗原虫、抗厌氧菌的作用。在养殖蜜蜂时，养蜂人为避免蜂群出现疾病感染，会使用此类抗生素。由于硝基咪唑类药物具细胞诱变性，有潜在致畸、致癌和致突变的作用，甚至有遗传毒性[5-8]。该类药物在蜂蜜样品中的残留会对食品安全构成直接威胁，且上述4种药物，在药房易于购买获得，因此需加强检测。

    蜂蜜在食品工业与药用辅料中有着不可或缺的地位，为保障食品与药用安全，有必要建立一种前处理简单、检测快速、检测限低、定性与定量准确的测试方法。目前，硝基咪唑类药物的相关检测方法为试剂盒快速检测方法、液相色谱法和气相色谱质谱等方法[4]。蜂蜜中存在约70%～80%的糖，糖的去除是实验中的难点。如在前处理中不对糖进行去除，糖会随着流动相带入色谱系统与质谱系统，在色谱系统中会导致进样针与色谱柱的堵塞，也会影响质谱电喷雾过程，使测定的目标物受到基质干扰，产生基质增强或抑制效应，进而导致检测结果不准确。本方法使用了Na2EDTA-磷酸盐缓冲液作为提取溶剂，以QuEChERS dSPE EMR-Lipid为净化剂，SOULAB-ST C18色谱柱为分离手段，运用UPLCMS/MS中的多反应监测模式对蜂蜜样品中的塞克硝唑、甲硝唑、替硝唑和奥硝唑进行检测。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    色谱纯乙腈、甲醇购自于欧姆尼公司；分析纯试剂无水磷酸氢二钠、无水磷酸二氢钠、乙二胺四乙酸二钠盐购自于上海麦克林生化科技有限公司；净化剂QuEChERS dSPE EMR-Lipid购买于安捷伦科技有限公司。实验用水为密理博纯水机制备的去离子水；塞克硝唑、甲硝唑、奥硝唑和替硝唑购自中国食品药品检定研究院，含量均不小于99.0%。

    1.2 仪器与设备

    超高效液相色谱仪Agilent LC1290 ......