食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测方法的探讨
单增,初筛,1目的和意义,2国家标准检测方法GB4789.30—2016的探讨,1增菌,2分离,3初筛,4鉴定,5结果报告,3结语
张慧珍(谱尼测试集团股份有限公司,北京 100194)
李斯特氏菌属隶属革兰氏阳性细菌中厚壁菌门,李斯特氏菌属可划分为6个菌种,即单核增生李斯特氏菌(L. monocytogenes)、英诺克李斯特氏菌(L. innocua)、斯氏李斯特氏菌(L. seeligeri)、威尔斯特氏菌(L. welshimeri)、伊氏李斯特菌(L. ivanovii)和格氏李斯特菌(L. grayi)[1]。在这6个菌种中只有单核增生李斯特和伊氏李斯特氏菌可以引起动物发病,其中通常只有单核增生李斯特氏菌和人类的李斯特氏菌症相关。单核细胞增生李斯特菌是一种人畜共患病的病原菌,能引起人畜的李氏杆菌病,人畜感染后主要表现为脑膜炎、败血症和单细胞增多,尤以妊娠期妇女,新生儿及免疫功能低下的病人更易感染。因此,李斯特氏菌中最具检测意义的是单核增生李斯特氏菌。
单核细胞增生李斯特氏菌广泛分布于自然界,如土壤、屠宰场、食品生产加工器具和多种食品中,动物或人体也带有此菌。食品中存在的单核细胞增生李斯特氏菌对人类的身体健康极具危害,该菌在 4 ℃的环境中仍可生长繁殖,是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌之一。
当前对单核细胞增生李斯特氏的检测方法主要有传统检测方法、环介导等温扩增反应(Loop-mediated Isothermal Amplification,LAMP)[2]、以聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)为基础的分子生物学技术等[3-4]。随着科技不断发展,针对食源性致病菌的检测技术也越来越多,新兴的检测方法具有检测周期短、成本高等特点,而大多数食品生产、食品流通企业仍会选择低成本的传统的国家标准检测方法。想要得到精准的检测结果,新兴的检测方法依赖于试验设备,而传统的检测方法更依赖于人员的经验,因此采用传统的方法检测单增李斯特氏菌对试验员提出了更高的要求。
1 目的和意义
本文主要从试剂准备、增菌、划线分离及生化鉴定等方面阐述了对单核细胞增生李斯特检测的一些理解,以期为检测人员依据《食品安全国家标准 食品微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验》(GB 4789.30—2016)进行食品中单增李斯特氏菌检测提供参考 ......
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