崔佳敏，李 敏，左 旸，蒲 洋

    (鲁东大学 农学院，山东烟台 264000)

    藻红蛋白(Phycoerythrin，PE)作为一种重要的藻胆蛋白，是红藻、蓝藻光合作用的捕光色素蛋白之一[1-2]。水溶性的PE作为天然色素在食品领域、化妆品领域和染料领域等具有广泛的应用[3]。同时PE独特的光学特性能够用于荧光标记探针、光敏材料等的制作[4-5]。不同纯度(Aλmax/A280)的PE用途不同，食品级纯度大于0.7，药品级纯度大于3.0，PE的纯度在极大程度上决定了其价值[6]。

    龙须菜(Gracilariopsis lemaneiformis)作为实现了南北方海域大规模人工栽培的江蓠科(Gracilariaceae)海洋红藻，富含红藻多糖和多种有益营养物质，不仅具有水域生态修复功能，还是提取琼胶的优良原材料和具有高保健价值的天然食品[7-8]。作为我国人工栽培规模名列前茅的大型经济海藻，目前主要用于琼胶制取和食用，其潜在的经济价值有待进一步开发[9-10]。其中富含的PE为三峰型的Ⅰ型R-PE，可见光区吸收光谱中，于498 nm、540 nm和565 nm有3个明显吸收峰，且最大峰值位于565 nm处[11]；多波长的激发光激发，都会获得580 nm为最大峰的特征荧光发射光谱。截至目前，这种高价值的PE还未被很好地开发和利用。

    PE的纯化方法决定了其纯度以及经济价值，也对其进一步的开发和利用有决定性作用。目前国内外报道了很多分离纯化龙须菜中所含蛋白质的工艺，主要包括细胞破碎、硫酸铵分馏及柱层析等步骤[12-13]。破碎细胞的方法主要包括超声破碎、组织捣碎、反复冻融法和溶胀法等；得到组织破碎液后，再通过硫酸铵分级沉淀、等电点沉淀和超滤等方法进行粗提；最后综合利用羟基磷灰石、分子筛(Sephadex G-100)、离子交换(DEAE-Sepharose Fast Flow)等层析介质进一步纯化PE[14-16]。但通过疏水层析介质纯化龙须菜PE的方案还未见报道。

    本研究在低温下，采用组织匀浆机破碎采集的龙须菜藻体，硫酸铵沉淀后用磷酸盐缓冲液重悬得到PE二次粗提液，再依次运用疏水层析介质和分子筛层析介质进行PE纯化 ......