数字PCR在食品安全检测中的应用
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郑雯馨,滕 达(内蒙古中普检验检测有限公司,内蒙古赤峰 024000)
近年来,在食品领域,我国与世界各个国家的贸易合作不断被深化,食品安全也开始成为市场监管的关键[1]。根据调查,在国际食品贸易当中,每年由于食品中掺杂动植物源成分或者由于失信问题而造成的损失超过400亿美元。在这样的背景下,运用非培养宿主式的检测方法是十分重要的,这种方法具有精准、快速的特点,可以有效降低在生产、运输、销售以及储存等环节中出现的食品安全风险,同时可以提高对各类食品的监管效率。数字PCR技术在这样的背景下出现,且已得到了广泛的应用。
1 数字PCR技术的概述
数字PCR即聚合酶链式反应,属于分子生物学领域中的方法。该技术可以被细分为微滴式和芯片式两种类型。其中微滴式数字PCR技术的特点是将待检测样本反应液分为由若干乳液包裹的微液滴,需要对不同的微滴内进行PCR扩增反应,并对荧光信号进行检测,最后根据相应的比重来对目的序列的含量进行检测和计算。而芯片式数字PCR技术则需要利用微流控技术将反应仓导入到芯片上,然后进行PCR反应。此外,还可以利用相近基因芯片法对反应仓中的荧光信号进行检测,并对目的序列含量进行计算和判断。上述方法在实际应用时,样品都会发生20 000多个PCR反应,实现了精准定量检测的要求[2]。
数字PCR技术包括以下3个应用步骤。①稀释核酸模板,然后将其分配到独立的反应单元当中,不同单元所对应的DNA模板分子是不同的。②在反应单元中开展PCR扩增反应,并在反应完成后统计荧光信号。③统计荧光信号阳性结果在反应单元中的比例,然后推算核酸序列拷贝数。
2 数字PCR在食品安全检测中的应用优势
2.1 方便性
在过去,食品安全检测过程需要开展大量复杂的操作 ......
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