基于上转换荧光纳米材料免疫层析法快速检测甲硝唑的研究
包被,试纸,1材料与方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3实验方法,2结果与分析,1标记抗体pH值确定,2标记纳米材料粒径确定,3检测线包被蛋白浓度确定,4批内精密度,准确性,5批间精密度,6检测限,3结论与
朱凡君,韦何雯,郭跃平,费建枫(1.金华市食品药品检验检测研究院,浙江金华 321000;2.杭州纽太生物科技有限公司,浙江杭州 310000)
甲硝唑(Metronidazole,MNZ),又名灭滴灵,属于硝基咪唑类抗生素,能快速杀灭厌氧细菌和抑制感染,在1978年被世界卫生组织定为抗厌氧菌首选药[1]。豆芽在种植、运输和保存过程中,由于保存方法不当,容易导致厌氧细菌繁殖,影响豆芽保质期和品相,因此某些不良商家通过添加甲硝唑等抗生素提高豆芽产量和延长保质期。但硝基咪唑类药物对哺乳动物具有致癌、致畸、致突变作用和遗传毒性,通过食品接触可能会对人们的身体健康构成潜在威胁[2]。国家标准《食品安全国家标准 食品中兽药最大残留限量》(GB 31650—2019)中规定动物源性食品中不得检出甲硝唑[3]。因此,甲硝唑残留量的检测至关重要。目前,精准检测甲硝唑残留的方法主要有高效液相色谱法[4]、液相色谱-质谱联用法[5],而现场快速检测技术主要有胶体金免疫层析。前两种方法灵敏度高、重复性好、检出限低,但样品前处理烦琐、仪器设备昂贵,对操作人员的要求高,不适用于现场快速检测[1],后者虽能实现现场快速检测,但该方法多用人眼目测条带显色的有无或深浅进行结果判读,存在人为主观判断误差,且无法定量检测。随着技术发展,相较于胶体金免疫层析技术,近些年出现了可定量检测的免疫层析技术。免疫层析技术根据检测结果能否定量可分为定性检测和定量检测。定性检测主要有胶体金和乳胶免疫层析试纸[6-7];定量检测主要有时间分辨、量子点和上转换发光免疫层析试纸。镧系上转换发光材料是一类重要的稀土发光材料,利用近红外光作为激发光源,其穿透能力强,能够避免生物样品的自体干扰,从而降低检测背景的干扰,提高信噪比,且发光过程中在材料内部属于物理过程,在此过程中没有衰减或降解,同时检测过程不受液体样品或者采样条件的影响,所以具有较高的稳定性。本研究为解决现有检测技术问题,开发了一种灵敏度高、特异性好、抗干扰性强、可现场检测的甲硝唑上转换发光免疫层析试纸。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
蔗糖、海藻糖、牛血清白蛋白(BSA)、羊抗兔IgG、兔IgG、Tween-20 ......
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