白海娜

    (吉林化工学院 生物与食品工程学院，吉林吉林 132022)

    在氧化应激过程中，自由基被释放出来攻击生物体，包括其DNA、RNA、蛋白质等物质，最终引起细胞损伤、坏死或凋亡，导致机体紊乱和各种疾病，包括癌症、心血管疾病、糖尿病和衰老[1-3]。许多学者认为食物中的天然抗氧化剂比合成抗氧化剂更安全、更健康[4-5]。榛蘑是我国一种重要的药食两用真菌，富含多糖，是药品、食品工业共同关注的热点。据报道，榛蘑多糖有提高免疫力、抗肿瘤、降糖、抗突变和抗衰老等功效[6-9]。本课题建立紫外和H2O2氧化损伤酵母细胞的模型，研究榛蘑多糖对紫外和H2O2氧化损伤酵母细胞的作用，旨在评价榛蘑多糖抗紫外和抗H2O2氧化损伤的活性。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    酵母菌由安琪牌高活性干酵母活化而得；榛蘑(吉林市大润发超市)；无水葡萄糖、酵母膏、琼脂粉、磷酸二氢钾、蛋白胨、磷酸氢二钠和过氧化氢(天津市凯信化学工业有限公司)。

    1.2 仪器与设备

    高压蒸汽灭菌锅；电子天平；折叠式恒温摇床；紫外光光度计；超净工作台；离心机；生物恒温培养箱。

    1.3 试验方法

    1.3.1 YEPD 培养基配制

    (1)液体培养基配制方法。溶解10 g 酵母膏、 20 g 蛋白胨、20 g 葡萄糖于1 000 mL 水中，在温度为115 ℃的条件下灭菌。

    (2)固体培养基配制方法。在液体培养基基础上，加入2%琼脂粉，在115 ℃条件下灭菌20 min。

    1.3.2 酵母菌活化培养

    (1)酵母菌活化。在无菌条件下，取1%酵母粉末加入已灭菌的5%葡萄糖溶液中，置于28 ℃摇床中振荡培养(转速200 r·min-1)活化3 h ......