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编号:351737
运用PCR定量分析植物蛋白饮料中杏仁源性成分的研究
http://www.100md.com 2022年12月30日 食品安全导刊 2022年第34期
荧光,1材料与方法,1材料与试剂,2仪器与设备,3试验方法,4Ct值与DNA浓度的关系,5杏仁质量浓度与DNA浓度的关系,6样品检验,2结果与分析,1Ct值与DNA浓度的实验结果,2杏仁质量浓度与DNA浓度的
     庞 婕,胥小荣,孔庆岩,刘 杰

    (承德市食品药品检验检测中心,河北承德 067000)

    承德处在燕山山脉,盛产杏仁,承德杏仁颗粒饱满,肉厚而细,以此杏仁为原料,加入水、白糖等以特有工艺制作承德杏仁露,不仅香味独特,功效也较多。杏仁里含有黄酮及多酚类物质,该物质能够降低人体内胆固醇的含量[1],因此杏仁露深受中老年人的喜爱。杏仁露中蛋白质、多种维生素及微量元素等含量比较高,具有一定的保健功能[2]。随着人们生活水平的提高,杏仁露也受到越来越多人的喜爱和关注,然而部分不法商贩为了牟取暴利在食品中掺杂掺假,因此建立准确、有效的杏仁源性成分的定量检测方法意义重大。

    目前,PCR 定量方法是根据样品最终扩增产物进行定量分析,通常用凝胶电泳法进行分离,并用荧光染色来检测。但在PCR 反应中,由于反应体系和反应条件等因素会影响PCR 反应效率,甚至出现一些非特异性扩增产物,用终点法来衡量源性成分含量不够精确。实时荧光定量PCR 是指在PCR 反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号的积累对整个PCR 进程进行实时检测,在PCR 反应过程中,随着循环数的增加,PCR 产物量增加[3]。相应的荧光信号强度也跟着增强,同时不断地收集荧光信号。随着反应的进行,根据检测到的荧光信号可以得到一条以循环数(Cycle Threshold,Ct)为横坐标和荧光强度(△Rn)变化为纵坐标的“S”形荧光扩增曲线[4]。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    1.1.1 样品来源

    纯杏仁,购自承德市宽广超市;10 个不同品牌的杏仁露,分别购自承德市八县三区,每个品牌购买一个批次。

    1.1.2 试剂

    植物基因组DNA 提取试剂盒,广州双螺旋基因技术有限公司;杏仁原性成分核酸检测试剂盒(PCR荧光探针法),广州双螺旋基因技术有限公司。

    1.2 仪器与设备

    实时荧光定量PCR 仪-CFX96 ......

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