陈 晨，张焕新，王海波，江 娟

    (江苏农牧科技职业学院 食品科技学院，江苏泰州 225300)

    油用牡丹品种“凤丹”，由于出油率较高、结籽较多、适应性能力较强等优点，被视为食用油的良好来源[1]。2011年，牡丹籽油被作为一种健康营养的新型资源食品而备受青睐，但生产过程中，牡丹籽粕作为附属品却被直接丢弃，造成资源的虚耗和环境的破坏[2]。因此，研究牡丹籽粕中的功能性成分，对提高牡丹籽的综合利用率有着重要的影响意义。

    牡丹籽粕中富含脂肪酸、多酚、多糖和黄酮类化合物等。其中的黄酮类物质抗氧化性极强，还具有稳定胆固醇、抗菌抗病毒等作用。本文以牡丹籽粕“凤丹”为原材料，通过单因素和正交实验优化牡丹籽粕总黄酮物质的提取工艺条件，还研究了牡丹籽粕黄酮类物质对DPPH 自由基、羟基自由基及超氧阴离子自由基的清除能力，考察其抗氧化能力，为进一步开发和利用牡丹籽粕奠定了理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料、试剂与仪器设备

    “丹凤”牡丹籽壳，众达合作社基地。

    无水乙醇、亚硝酸钠、九水合硝酸铝、氢氧化钠、芦丁(HPLC ≥98%)和石油醚(30～60 ℃)，上海沃凯生物技术有限公司。

    T6 紫外可见分光光度计，上海元析仪器有限公司；RE-52D 旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器厂；SHB-III 循环水式多用真空泵，上海越众仪器设备有限公司；KQ-250B 超声波清洗机，上海锦玟仪器设备有限公司；Labconoo FreeZone 6 L 型台式冻干机，广州赛拓仪器科技有限公司。

    1.2 实验方法

    1.2.1 牡丹籽粕预处理

    将牡丹籽粕置于粉碎机中粉碎，过80 目筛。取适量牡丹籽粉加石油醚于60 ℃恒温水浴锅中索氏抽提10 h。脱脂完成、晾干后放入45 ℃的烘箱中，低温烘干8 h，取出冷却到室温，备用。

    1.2.2 牡丹籽粕总黄酮提取物制备

    准确称取1.0 g 牡丹籽粕，将牡丹籽粕粉与乙醇混合均匀。置于超声波清洗器中超声辅助提取，提取完成之后，将提取液过滤。滤液在65 ℃下旋转蒸发直至无溶液蒸出，冷冻干燥，制成提取物冻干粉，冷藏备用。

    1.2.3 牡丹籽粕总黄酮得率测定

    用硝酸铝-亚硝酸钠比色法[3-4]测定牡丹籽粕总黄酮物质含量，以芦丁为标品，于510 nm 处测定吸光值，绘制标准曲线。

    (1)标准曲线绘制方法。精确量取0.1 mg·mL-1芦丁标准品0.15 mL、0.20 mL、0.25 mL、0.30 mL、0.40 mL、0.50 mL 和0.60 mL 置于5 mL 离心管 ......