正交试验法优选液体发酵云芝糖肽提取工艺条件
次数,1材料与方法,1菌种,2发酵培养基,3仪器与试剂,4试验方法,2结果与分析,1单因素试验结果,2正交试验法优化云芝糖肽提取工艺,3结论
李 岩(广东岭南职业技术学院,广东广州 510663)
云芝糖肽(Posaverptidum)是从多孔菌科(Polyporaceae)云芝属(Polystictus)真菌云芝(Coriolus versicolorL.ex.Fr.)(菌株Cov-1)的菌丝体中提取的高分子糖肽聚合物[1-3],具有补益精气、健脾养心的功效,对细胞免疫功能和血象有一定的保护作用,可用于食管癌、胃癌及原发性肺癌患者放疗、化疗所致的气阴两虚,已开发为中成药[4-6]。
目前,云芝糖肽通常采用液体发酵培养,因为液体发酵具有高效生产、萃取工艺简便、萃取成本低等特点[7-9]。已报道的云芝糖肽的提取方法有水提法、水提醇沉法、酶制剂提取法、超声提取法和微波提取法等,其中水提醇沉法因操作简便且安全而被广泛使用[10]。为提高液体发酵云芝糖肽的提取率,本文以云芝糖肽含量为指标,采用单因素和正交试验法对液体发酵的云芝进行水提醇沉工艺优化,采用苯酚-硫酸法进行云芝糖肽含量的测定,从而筛选出高提取率的提取方法。
1 材料与方法
1.1 菌种
云芝菌种由本实验室保存,培养条件为转速150 r·min-1,温度28 ℃,装液量100 mL/250 mL 三角瓶,培养96 h。
1.2 发酵培养基
葡萄糖30 g、玉米粉15 g、豆饼粉20 g、麸皮 7.5 g、磷酸二氢钾3 g、蛋白胨1 g、硫酸镁0.2 g ......
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