李 伟，任重杰

    (郓城县检验检测中心，山东菏泽 274700)

    近年来，由于食品行业的迅速发展，食源性致病微生物引发的食物中毒、食源性疾病的发生率不断增加，给人们的健康和生活带来极大的威胁，同时也给我国的公共健康和经济带来了巨大损害。由于食物环境的原因，大肠杆菌不耐热肠毒素一直是引起食物中毒的主要原因。因此，快速、灵敏地检测出大肠杆菌不耐热肠毒素对食品安全管理具有重要意义。

    1 交叉引物扩增法技术及应用

    1.1 交叉引物扩增方法概述

    交叉引物扩增技术是一种新的核酸等温扩增技术。交叉引物扩增技术采用一种DNA 聚合酶，在温度为62 ℃的恒温下保温1 h，即可特异、快速、高效地完成核酸的扩增[1]。本技术与快速检测技术(如快速检测纸条、一次性核酸检测设备)的组合，为临床快速检测、分子诊断、检疫和生物医药等领域的发展提供了新的检测方法。

    1.2 交叉引物扩增方法特点

    交叉引物扩增方法在检验检疫、检测突发传染病和医院的早期筛查中得到了广泛的应用。由于CPA 的成本较低，CPA 的扩增只能在离心机和诸如水浴、金属浴等简单的恒温装置中进行。由于其操作简单，且对操作者不具备太高的操作水平要求，一般人只要经过简单的训练或自学就可熟练使用，这为推广这项技术创造了良好的条件。该方法具有很好的特异性，能为6 个目标基因区设计6 ～8 条特异引物，以确保反应的特异性[2]。同时，其灵敏度高，可从少量复制中分离到目标基因，其敏感性能够达到10 个拷贝。产品的检测方法简单，特异性高，可用琼脂糖凝胶电泳法进行鉴定，也可将荧光染料添加到扩增产品中，根据颜色的改变来判断 ......