张文艳，李茂东，黄 堃，赵仲霞，阮苏梦，师 睿*

    (1.昭通学院 化学化工学院，云南昭通 657000；2.云南三鑫职业技术学院 医药健康学院，云南文山 663000)

    花椒是药食两用的植物性原料，研究花椒的抑菌活性意义重大[1]。本研究从天然抑菌产物角度出发，研究青花椒提取物对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑制作用，深化昭通农副产品的精深加工[2]。

    1 材料与方法

    1.1 材料与仪器

    青花椒，昭通市永善县；营养肉汤培养基、营养琼脂，广东环凯微生物科技有限公司；钾离子检测试剂盒，南京建成生物工程研究所；96 孔板，NEST；移液枪，大龙兴创实验仪器(北京)有限公司；PT-3502 C 全波长酶标分析，北京普天新桥技术有限公司。

    1.2 实验方法

    1.2.1 青花椒提取物的制备

    粉碎后过60 目筛的青花椒与75%酒精按照料液比1 ∶15(m∶v)混合，浸泡过夜，50 ℃超声提取50 min，滤液浓缩至浸膏，配制成母液，过滤除菌，-80 ℃保存备用。

    1.2.2 滤纸片的准备

    用6 mm 打孔器对滤纸打孔，121 ℃灭菌15 min，烘干备用，灭菌后的滤纸不能久放，否则会影响实验结果的可靠性[3]。

    1.2.3 菌悬液的制备与测定

    菌悬液浓度为107CFU·mL-1，避光培养温度为37 ℃，于600 nm 处测定吸光值。

    1.2.4 青花椒提取物对金黄色葡萄球菌抑制作用研究

    (1)抑菌圈的测定 ......