邹雨虹，杨丹妮，张晓金

    (常州市食品药品纤维质量监督检验中心，江苏常州 213000)

    水果和蔬菜富含各类营养物质，有益于预防慢性疾病以及提高免疫力[1]。即食果蔬是指以新鲜水果和蔬菜为主要原料，经过加工处理后，通过冷藏或低温运输并进入冷柜销售的即食或即用的果蔬制品[2-3]。即食果蔬在流入市场前一般没有经过高温加工等灭菌步骤，人们可以直接鲜切、凉拌食用，容易出现交叉污染继而引发食源性疾病[4]，危害到人们的健康。其中，大肠埃希氏菌、单增李斯特菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等致病微生物均在黄瓜、莴笋、苦苣、番茄、菠菜、瓜类、苹果和梨等即食果蔬中检出[5-6]。

    目前针对即食果蔬中致病菌检测的方法主要有传统分离培养及生化鉴定、酶联免疫吸附、聚合酶链式反应(主要为荧光定量PCR 法)、基因芯片法等[7]，常规的分离培养基及生化鉴定检测方法仍是我国食品中常见致病菌检测的主要方式[8]。但此方法耗时长且步骤烦琐，一般需要5 ～7 d 得出结果。考虑到果蔬保质期极短的特殊性，检测周期过长会严重影响果蔬产品的快速流通，很大程度上加重了即食果蔬生产企业在储藏及质量管理上的负担。

    近年来出现的PCR 技术逐渐被应用在食品中致病微生物的检测中，该技术缩短了检测时间，提高了检测灵敏度及检测效率[9]，但无法利用一次实验操作同时对多种致病菌进行检测，对于目前生鲜果蔬流通不畅的问题仍无法提供解决思路。因此，利用膜芯片检测工作平台开发一种针对多种致病菌同步快速检测的方法，对于即食果蔬行业的发展具有重要的现实意义。

    膜芯片技术基于反向斑点杂交原理开发，利用反向斑点杂交技术(Reverse Dot Blot，RDB)将待测基因中的特异性序列作为探针固定在尼龙膜上，并采用生物素标记的引物进行基因的扩增，同时将扩增产物与固定在尼龙膜上的探针进行杂交 ......