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编号:547320
一起副溶血性弧菌食源性聚集事件的实验室检测及病原分析
http://www.100md.com 2023年7月9日 食品安全导刊 2023年第15期
1材料与方法,1材料与试剂,2设备与仪器,3试验方法,2结果与分析,1病原体检测,2血清学试验,3毒力基因鉴定,4PFGE分子分型,5药敏试验结果,3结论与讨论
     李佳琪,罗昱玥,章兴隆,刘义萍,周莹冰

    (重庆市渝中区疾病预防控制中心,重庆 400010)

    副溶血性弧菌是一类革兰氏阴性无芽孢杆菌,具有嗜盐性,可引起人类多种不同疾病,如败血症、急性胃肠炎、伤口感染等[1]。副溶血性弧菌最早于1950 年从日本1 例食物中毒的病人粪便中初次分离得到,是最常见的食源性致病菌之一,在近海岸的海水、海产品、海底沉积物中广泛存在。由于海产品在运输和销售中会交叉污染,导致副溶血性弧菌在淡水产品中也被大量检出。人们摄入被副溶血性弧菌污染的食品会引发食物中毒,导致患者出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻和发烧等典型急性胃肠炎反应。副溶血性弧菌是细菌性食物中毒事件中的重要病原体。2021 年4 月18 日,渝中区疾病预防控制中心接到某医院电话报告称“某游轮出现10 余名疑似食物中毒病人”,立即赶往医院与游轮现场进行流行病学调查,采集肛拭子,留样食品进行检测。根据患者的临床表现、流行病学调查结果、实验室检测结果综合研判,认为本次事件是一起由副溶血性弧菌引起的食源性聚集事件。为进一步了解阳性菌株的病原学特征以及各菌株之间的相关性,本研究对分离的副溶血弧菌进行血清学鉴定、实时荧光PCR 鉴定毒力基因、脉冲场凝胶电泳(Pulsed Field Gel Electrophoresis,PFGE)分子分型和药敏试验。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    显色培养基,科玛嘉微生物技术有限公司;其余培养基,北京陆桥技术股份有限公司;副溶血性弧菌血清,日本生研公司;病毒核酸提取试剂盒(磁珠法),江苏硕世生物科技有限公司;诺如病毒G Ⅰ/G Ⅱ双重荧光PCR 检测试剂盒、食源性致病菌核酸多重实时荧光PCR 检测试剂盒、副溶血性弧菌(tdh、trh、tlh)三重核酸检测试剂盒,北京卓诚惠生生物科技有限公司;VITEK 2 Compact GN 鉴定卡,法国生物梅里埃股份有限公司;限制性内切酶Xba Ⅰ、Not Ⅰ ......

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