严大为，李 睿，陆诚玮，高峄涵*

    (1.上海新型烟草制品研究院有限公司，基础研究室，上海 201315；2.上海市食品药品检验研究院，药理毒理所，上海 201203)

    L-香芹酮是留兰香油的主要成分，含量占比在50%～60%，具有很浓郁的留兰香香气，其在食品香精、牙膏、硬糖、口香糖和各种饮料中有着广泛的应用[1-2]。近年来，随着雾化平台的兴起，L-香芹酮等香精香料的使用方式可改变为雾化吸入的方式摄取。L-香芹酮虽是食品级添加剂，一定剂量内经口摄入较为安全，但其吸入途径的安全性却鲜有报道，尤其是关于L-香芹酮吸入途径的遗传毒性。

    有报道称消费者在电子烟烟液中违规添加四氢大麻酚等物质，引起多起健康事件，添加剂的吸入安全性已引起广泛关注[3]。同时，有研究表明不同的电子烟烟液气溶胶的细胞毒性具有较大差异，且与电子烟烟液中的添加剂密切相关[4-7]。虽然THORNE等[8]开展了电子烟烟液气溶胶的Ames试验，结果显示受试菌株未发生基因回复突变。MANOJ等[9]也未观察到在与卷烟等同的特定剂量下电子烟烟液气溶胶会引起细胞毒性和遗传毒性的情况。同时，AZZOPARDI等[10]也证明电子烟烟液气溶胶的细胞毒性相对传统卷烟气溶胶的细胞毒性较小，但对单一添加剂的吸入途径的遗传组合毒性评价还未见报道，尤其是添加后对烟液气溶胶整体的遗传毒性影响。因此，本文拟采用气-液(琼脂)界面暴露的方式，选取TA97a、TA98、TA100、TA102和TA1535菌株和中国仓鼠肺细胞(CHL细胞)等受试体系，根据Ames试验、染色体畸变试验、体外微核试验等遗传毒性检测方法，本着风险最大化原则，选取美国香精和提取物制造商协会公认在烘焙食品中安全无毒使用L-香芹酮浓度的3倍(300 mg·L-1)[11]，对含有L-香芹酮雾化剂参比烟液气溶胶的遗传毒性进行初步评估，并与雾化剂参比烟液气溶胶进行比较，为L-香芹酮添加剂的合理安全使用提供参考和支持。

    1 材料与方法

    1.1 材料、试剂和仪器

    TA97a、TA98、TA100、TA102和TA1535菌株，来源于美国Moltox公司；中国仓鼠肺细胞，来源于中国科学研究院细胞库；A549人肺腺癌细胞，来源于复旦大学药学院。

    琼脂粉(212304A级)，美国BD公司；氯化钠(≥99.5%)，海凌峰化学试剂有限公司；组氨酸(99%)，北京百灵威科技有限公司；生物素(99%)，北京百灵威科技有限公司；营养肉汤(CM1168B)，英国OXOID公司；RPMI 1640细胞培养基(Lot2200921) ......