郭方圆，张方方，孙 悦

    (1.宁夏大学 食品与葡萄酒学院，宁夏银川 750021；2.安琪酵母股份有限公司，酵母功能湖北省重点实验室，湖北宜昌 443000)

    在葡萄酒酿造过程中，酵母影响葡萄酒的风味，其中非酿酒酵母被越来越多的研究者所重视。不同地域葡萄酒的独特口感和香气差别主要源于各地区独特的非酿酒酵母。因此，找到区分不同非酿酒酵母菌株的鉴别方法，确定相应的非酿酒种属，可为研究各类非酿酒酵母的理化特性和提升葡萄酒酿造水平打下基础。本文通过介绍几种DNA分子标记方法的原理和优缺点，探讨其在非酿酒酵母菌株区分中的应用状况与前景。

    1 RAPD标记法

    1.1 RAPD技术在非酿酒酵母菌株区分中的应用

    随机扩增多态性DNA法(Random Amplified Polymorphic DNA，RAPD)是一种DNA多态性检测技术。RAPD的原理是以不同菌株的基因组DNA为模板，采用随机的寡聚核苷酸为引物，在热稳定DNA多聚酶的作用下，对基因组PCR扩增，可以检测到整个基因组的DNA，显示出不同菌株之间的差异。

    LOPANDIC等[1]用RAPD技术对Metschnikowia的10个种进行研究，RAPD-PCR指纹图谱支持了该属在种水平的分离。李冬梅等[2]以RAPD技术可以明确鉴别Candida albicans和Candida tropicalis种内差异。徐勇等[3]采用RAPD技术成功对Candidasp、Pachysolen tanophilu、Pichi stipit不同种进行区分。

    1.2 RAPD优缺点

    RAPD技术简单且效率高，短时间内可获得大量DNA多态性片段 ......