结直肠癌患者外周血Th1和Th2细胞的检测与临床意义*
细胞因子,1材料与方法,2结果,3讨论
黄家豪 曹云飞 高枫(广西医科大学第一附属医院结直肠肛门外科 广西南宁 530021)
结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)是临床上常 见的消化系统肿瘤,每年在全世界范围内的新增病例约为945,000例,死亡人数达492,000人/年,同时也是我国常见的恶性肿瘤之一,严重威胁着人们的身心健康[1]。结直肠癌强调以手术为主的综合治疗,但总体治疗效果不尽人意[1]。近年来,越来越多的研究围绕结直肠癌患者的免疫状态及其机制展开,而免疫学的研究成果将为肿瘤生物治疗提供新的思路与途径。
肿瘤的进展包括宿主的细胞免疫与肿瘤通过多种分子机制互相作用的过程。研究表明,包含多种免疫细胞类型的宿主细胞免疫体系以复杂的方式与肿瘤细胞进行作用,进而发挥最重要的肿瘤防御机制[3,4]。尽管结直肠肿瘤组织及癌旁组织内有大量免疫细胞浸润,但免疫低应答或无应答时常发生在结直肠癌患者身上[5~8]。
本研究通过流式细胞技术观察结直肠癌患者与健康人外周血CD4+T辅助细胞(helper T cell,Th细胞)亚群Th1细胞和Th2细胞比例的变化;采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(quantitative Real-time RT-PCR)的方法,从 mRNA 水平检测转录因子T-bet/GATA-3表达量的变化;并利用液相芯片技术检测结直肠癌患者和健康人群血浆中IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-6、IL-13和IL-15的表达水平,以期发现结直肠癌进展过程中免疫功能的变化,有利于完善结直肠癌发生发展的肿瘤免疫机制,并为肿瘤疫苗提供潜在的治疗靶点。
1 材料与方法
1.1 研究对象 选取广西医科大学第一附属医院结直肠外科2011年3月至2011年10月初次行手术治疗的43例结直肠癌患者(肠癌组)。所有样本均符合人体实验伦理学标准,征得外周血标本提供者知情同意并签署知情同意书,年龄40~86岁,中位年龄58.20岁。男24例,女19例,男女比例为1.26∶1。Dukes分期:A期13例,B期10例,C期14例,D期6例。根据肠癌患者有无淋巴结转移分为淋巴结转移阴性结直肠癌患者(Dukes A期+Dukes B期)与淋巴结转移阳性结直肠癌患者(Dukes C期+Dukes D期)。组织学分型:腺癌41例,黏液腺癌2例。所切除标本均经病理学诊断证实。患者外周血抽取前未服用非甾体类抗炎药(NSAID),并未经任何化学治疗或放射治疗。收集同时期体检健康者30例(对照组),年龄53.24±12.46岁 ......
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