脾细胞移植诱导大鼠小肠移植微嵌合体形成的实验研究*
免疫耐受,移植物,1资料和方法,2结果,3讨论
姜涛 姜峰奇 朱跃坤 朱安龙 朴大勋(哈尔滨医科大学附属一院结直肠外科 黑龙江哈尔滨 150001)
器官移植是针对于终末期器官功能衰竭的一种有效治疗手段,许多新型免疫抑制剂的出现,大大减弱了移植排斥反应,延长了移植物的存活时间及存活率。但存在长期服用抗排斥药物带来的副作用及排斥反应的反复发作,最佳的处理方法是诱导一种持久稳定、无需服用药物的免疫耐受来解决这一难题。通过建立嵌合体诱导免疫耐受是目前解决器官移植的一种有效的尝试。本实验在建立大鼠同种异体节段性小肠移植模型的基础上,采用脾细胞输注移植观察移植大鼠的微嵌合体形成,探讨微嵌合体形成与移植免疫耐受的关系。
1 资料和方法
1.1 实验动物 供体为雄性SD大鼠;受体为雌性Wistar大鼠,均为SPF级,体重220~260g,哈尔滨医科大学动物实验中心提供。
1.2 脾细胞悬液的制备和移植 供体雄性SD大鼠采用1%戊巴比妥钠溶液腹腔内注射麻醉,无菌条件切取脾脏置于10%肝素钠盐水溶液中,将脾脏组织反复剪切后经200目钢网滤过,滤过液加入5m L淋巴细胞分离液,离心15min,吸取中层液体加入1640培养液5m L漂洗1次,再次加入1640培养液5m L,即为脾细胞悬液。
移植前4周将供体SD大鼠的脾细胞悬液1m L(细胞总数为1.5~2.0×107/m L;细胞活力≥95%)经舌静脉输注到受体Wistar大鼠体内。接受脾细胞移植的大鼠出现皮肤红斑 ......
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