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编号:759161
营养素介导的PPARa通路对肠道屏障功能影响的研究*
http://www.100md.com 2012年2月24日 结直肠肛门外科 2012年第2期
绒毛,切片,1资料和方法,2结果,3讨论
     姜涛 姜峰奇 金日明 朱跃坤 朱安龙 朴大勋

    (哈尔滨医科大学附属一院结直肠外科 黑龙江哈尔滨 150001)

    肠道屏障功能已成为判断危重患者预后的一个重要指标,对肠道屏障功能的研究已成为当今医学领域研究的一个重要课题 。肠道不仅是消化吸收器官,肠黏膜本身也是一道十分重要的防御屏障[1]。20世纪60年代Ravin等首先提出胃肠道是无明确感染灶患者多器官功能衰竭前发生脓毒症的潜在致病源。20世纪80年代Border等进一步提出肠源脓毒血症(GOS)的概念。临床上死于脓毒症的多器官功能不全综合征(MODS)患者30%找不到感染灶,但经血培养发现血中存在与肠道常驻菌相似的细菌。已有研究证明肠道在全身炎症反应综合征(SIRS)、脓毒症、多器官功能不全综合征的连续发生发展中起重要作用,因此人们认为肠道不仅是MODS的靶器官,更是MODS的启动者[2]。随着人民生活水平的提高及饮食结构的改变,结肠癌比例亦逐渐增多,通过实验分析不同营养素对肠道屏障功能的影响情况全面揭示PPARa通路的形成与肠道屏障功能的内在联系,并且在临床可以解释不同饮食对肠道屏障的影响并给予指导应用。本实验的研究方向目前在国内处于领先,为今后肠道屏障功能研究开辟了一条新的思路。

    1 资料和方法

    1.1 实验动物 50只哈尔滨医科大学动物实验室培育的wistar雄性大鼠,体重约在124~150g。将50只wistar雄性大鼠在本实验室适应7d(恒温恒湿,标准鼠食喂养)后随机分为三组,对照组、静脉营养组、肠内营养组,每组为13只。实验动物分笼饲养于20±2℃明暗各12h的清洁级动物实验室内,自由饮水与进食3周。

    1.2 试剂及仪器 兔抗PPARa抗体(哈尔滨杰恩来舶科技有限公司)、DBA显色试剂盒,乳酸测定试剂盒,PBS,4%甲醛(哈尔滨医科大学),普通饲料,(哈尔滨医科大学动物实验室),高脂肠内营养饲料能全力(纽迪希亚制药无锡有限公司),5%水合氯醛,肝素。

    石蜡切片机(Leitz,德国),微量加样器。p 1-20(Eppendorf,德国),微波炉(格兰仕,广东),电热恒温箱(SC-505,浙江),PHS-25型酸度计(上海),BHZ型双筒显微镜(Olympus,日本),数码医学图像分析系统软件,多聚乙烯导管,金属弹簧管,注射泵。

    1.3 营养液配制 静脉营养组以50%葡萄糖、10.3% 复方支链氨基酸和20%脂肪乳剂为基本液体,肠内营养组以能全力(每2092KJ溶液含蛋白质Protein 20g,脂肪Fat 19.5g ......

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