李德钢 李裕波 陈泛野 黄小明 黄世佳 江家鹏 吴卫 黄深 庞黎明

    (广西中医药大学第一附属医院外二科 广西南宁 530023)

    从基因水平阐明肿瘤发病机制已是目前一种常规研究手段，但短期内获取大量人体新鲜组织标本较困难，且部分研究涉及回顾性分析，这就需要借助于病理科长期保存的福尔马林固定石蜡包埋组织(FFPET)标本，然而从石蜡包埋组织标本中提取DNA难度较新鲜组织大，虽然目前已有较多这方面的研究[1～3]，但寻求一种简便、快速、批量、重复性好的方法一直是广大科研工作者的追求。从石蜡包埋组织中提取DNA的方法，一般主要包括脱蜡、消化和纯化3个步骤，笔者在实验过程中，将传统二甲苯脱蜡与DNA提取试剂盒相结合，摸索出一种从石蜡包埋结直肠癌组织中批量提取DNA的简便、快速、重复性好的方法，现报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料 随机选取广西中医大学第一附属医院2009年3月至2013年10月手术切除的福尔马林固定110例石蜡包埋结直肠癌组织标本。无菌操作常规切片，标本经石蜡切片机切成厚度10μm的6片组织装入1.5mL EP管中，每个标本用刀片的不同部位切片，每张刀片用完后均用二甲苯、无水乙醇处理后再次切片。

    1.2 主要试剂 二甲苯分析纯、无水乙醇分析纯(成都市科龙化工试剂厂)，20mg/mL蛋白酶K溶液(TaKaRa，目录号D9033)，北京天根公司血液/细胞/组织基因组DNA提取试剂盒(TIANamp Genomic DNA Kit)(目录号：DP304-03)，RIRP裂解液(碧云天公司，P0031E-1)，2×Taq PCR Master Mix(北京天根公司，目录号KT201-02)，DNA MarkerⅠ(北京天根公司，目录号：MD101-01)，琼脂糖(西班牙进口) ......