张猛 单宏鹏 陈锋 唐卫中

    (广西医科大学第一附属医院 广西南宁 530021)

    在正常和癌变的结直肠黏膜上皮组织中ERβ是主要表达的雌激素受体，而ERα则是极少表达或不表达[1、2]。在结直肠组织癌变过程中 ERβ 选择性表达缺失与结直肠癌分化的恶性程度有相关性，因此ERβ可能在大肠癌变过程中起抑癌的保护性作用[3]。许多共调节因子蛋白的表达水平或活性的改变会导致ER信号分子的改变[4、5]。特别是共激活因子的过表达和下调共抑制因子可使内分泌治疗的抑制作用无效，尤其是在应用选择性雌激素受体调节剂(selective estrogen receptor modulators，SERMs)例如他莫昔芬(tamoxifen)[6]。因此进一步开展雌激素受体共调节因子在结直肠中的作用的研究对CRC的激素替代治疗和针对ERβ分子的靶向治疗显得至关重要。本实验主要研究雌激素受体共激活因子其中之一AIB1在结直肠癌中的表达以及与临床资料间的关系。

    1 材料与方法

    1.1 材料 收集广西医科大学第一附属医院2014年03月至2014年11月行结直肠癌切除术的结直肠癌及其配对正常组织标本200例，其中男性119例，女性89例，平均年龄55.6岁。纳入标准：所有术后病理确诊为结直肠癌的病例。排除标准：无足够的标本量，无详细临床资料记录，患有两个及其以上的原发性癌症、患者术前进行抗癌治疗尤其是雌激素替代治疗的病例排除。配对正常组织术后病理证实为正常大肠组织。患者临床资料包括：年龄、性别、民族、肿瘤位置、肿瘤大小、大体病理类型、分化程度、病理分期、有无神经官侵犯、有无血管侵犯、TNM分期。本实验所用标本采集均经过患者本人知情同意且经过广西医科大学伦理委员会批准。本实验所有过程依照赫尔辛基宣言(Helsinki Declaration)进行。120例预备进行免疫组织化学检测的标本按照标准浸泡入10%的福尔马林溶液中。80例预备进行荧光定量PCR的新鲜组织放入液氮中速冻15 min后小心移入-80°C超低温冰箱中暂时储存。

    1.2 方法

    1.2.1 总RNA的制备和逆转录PCR 根据使用说明书从80例新鲜组织中提取总RNA(total RNA)应用总RNA提取试剂盒 (Cat＃12113KD1，AXYGEN，苏州，中国)。随即，应用NANODROP2000型核酸检测仪(Thermo Scientific， CA， USA)通过 A260/A280比值计算total RNA的纯度。根据使用说明书应用逆转录试剂盒 (Roche Diagnostics ......