黎武，宋劲松

    天门市第一人民医院普外1区湖北天门431700

    结肠癌为40～50岁人群高发的恶性肿瘤之一[1]。相关证据表明[2]，复发及转移是中晚期结肠癌患者死亡的主要原因，即使采取标准治疗方案，5年内复发率仍高达50%。随着研究的深入，有研究发现[3-5]，非编码基因在多种恶性肿瘤的发生、进展与转移过程中均发挥重要作用，如胃癌、大肠癌、胃肠间质瘤等。梁思远的研究发现[6]，长链非编码RNA 参与顺式调控、反式调控、转录激活、核内运输等多种基因转录过程，可作为生物标志物，而异常表达的长链非编码RNA可预测肿瘤的发生与转移。同源基因的转录反义RNA (homeotic genes transcript antisense RNA，HOTAIR)是第1 个被发现的通过表观遗传调控致癌的长链非编码RNA[7]，但目前其在结肠癌发生与转移中的作用机制尚不明确，有关结肠癌患者血清中HOTAIR 表达的相关研究鲜有报道。本研究检测了56 例结肠癌患者的血清及癌组织HOTAIR表达，并将血清HOTAIR表达与健康体检者进行比较，探讨血清及组织内HOTAIR 表达在结肠癌诊断及转移风险识别中的应用价值，现报告如下。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料

    选取2017年1月至2019年1月期间于本院就诊并接受手术的结肠癌患者56 例为研究对象，均经术后病理证实为结肠癌，排除合并其他部位肿瘤者。结直肠癌患者中男性39例，女性17例；年龄45～77岁，平均(60.89±9.58)岁；术后病理判断TNM分期Ⅰ期8例，Ⅱ期17例，Ⅲ期20例，Ⅳ期11例；29例有淋巴结转移，27 例无淋巴结转移。另随机选择同期来本院进行体检的健康体检者56 例为对照组。其中男性35 例，女性21 例；年龄37～72 岁，平均(58.50±9.21)岁。两组性别、年龄比较差异均无统计学意义(均P >0.05)，具有可比性。研究获医院伦理委员会批准，研究对象均签署知情同意书。

    1.2 纳入与排除标准

    纳入标准：(1)病理确诊为结肠癌；(2)年龄40～80 岁。排除标准：(1)既往恶性肿瘤病史；(2)合并心衰、心肌梗死等严重心脏疾病；(3)恶性贫血、感染性疾病等其他严重内科疾病；(4)采集前接受过肿瘤辅助治疗；(5)合并免疫性疾病。

    1.3 方法

    1.3.1 仪器及试剂5×g DNA Eraser buffer、CelmiR-39、gDNA Eraser、2×SYBR Premix Ex Taqtm、PrimeScript Enzyme、Nuclease free H2O(购自大连Ta-KaRa 公司)；氯仿、异丙醇、乙醇均购自重庆川东化工；TRIzol LS(美国Invitrogen公司)；无酶水洗涤核酸蛋白测定仪(美国Thermo公司)；低温冷冻离心机(美国Beckman公司Allagra-64R型)；微量台式高速冷冻离心机(美国Beckman 公司Micro-21R 型)；实时荧光定量qPCR仪(新加坡ABI公司)；Veriti-96型PCR仪(新加坡Life公司) ......