FOXD1的表达与结肠癌患者临床病理特征及细胞生物学行为的关系研究
生存率,蛋白,1材料与方法,1临床资料,2材料与仪器,3检测FOXD1在结肠癌组织中的表达,4沉默FOXD1对SW1116细胞生物学行为的影响分析,5统计学处理,2结果,1FOXD1蛋白在结肠
谢力,皈燕川北医学院附属医院肿瘤科 四川南充 637000
结肠癌是一种常见的恶性肿瘤,多发于中年以上男性,早期无明显症状,随疾病发展表现为便血、腹泻、便秘等[1]。结肠癌的病因目前尚不清楚,临床主要采用外科手术治疗,具有一定的临床疗效,但对于中晚期病灶广泛伴随远处转移的患者尚缺乏有效的治疗手段[2]。寻找新的肿瘤标识物评估结肠癌的病情发展和预后,分析其在结肠癌发生发展中的作用机制,对结肠癌的治疗具有重要作用。人转录因子叉头框1(humanforkheadboxD1,FOXD1)是FOX家族成员之一,研究显示[3-5],FOXD1在乳腺癌、非小细胞肺癌、胶质瘤等多种肿瘤均存在异常高表达,但其在结肠癌中的表达意义及作用机制目前尚不清楚。因此,本研究拟分析FOXD1在结肠癌组织中的表达水平及与患者临床病理特征、预后的关系,并探讨其对结肠癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响,现报告如下。
1 材料与方法
1.1 临床资料
收集2014年1月至2015年12月72例在本院行结肠癌手术患者的结肠癌组织和对应的癌旁正常组织(距离癌组织边缘约3 cm)各一份,癌旁组织经术后病理组织学诊断为正常黏膜组织。所纳入患者术前均未接受放化疗治疗,并对治疗内容知情同意,未合并其他恶性肿瘤,未合并严重心脑血管、免疫系统或血液系统疾病,均无严重肝肾功能不全,具有术后3年随访有效资料。72例患者中,男性42例,女性30例;年龄40~80岁,平均年龄(60.35±8.79)岁;肿瘤直径≤5 cm者40例,>5 cm者32例;肿瘤分化程度:高分化9例,中分化39例,低分化24例;TNM分期:Ⅰ期14例,Ⅱ期23例,Ⅲ期25例,Ⅳ期10例;合并淋巴结转移35例,无淋巴结转移37例。患者术后进入随访,采用门诊及电话形式进行,每3~6个月一次,随访截止时间为2019年1月,随访记录患者随访时状态(存活、死亡或其他)等,72例患者均具有完整的术后3年生存随访资料。
1.2 材料与仪器
7500 RT-PCR系统购自于美国Applied Biosystems公司;凝胶成像系统(型号Gel Doc XR)购自于美国Bio-Rad公司;人结肠癌细胞SW1116购自美国典型物种保藏中心;FOXD1 shRNA质粒及对照Control-shRNA购自上海吉凯生物有限公司;细胞培养基RPMI-1640、胎牛血清购自杭州四季青生物工程公司;MTT检测试剂盒购自北京中杉金桥生物技术公司;TUNEL检测试剂盒购自上海碧云天生物技术研究所;转染试剂、RT-PCR试剂盒均购自赛默飞世尔科技公司;Transwell小室、Matrigel基底膜 ......
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