刘 斌，刘 苏，朱风尚，陈锡美，吴建平，蒋 芳

    (1.上海市闸北区中心医院消化科，上海 200070； 2.上海同济大学附属同济医院消化科，上海 200065)

    非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis，NASH)的发病率日渐攀高，而病因及发病机制尚未阐明，大量研究证实NASH患者血清脂联素(adiponectin，Adipo)表达降低，脂联素与NASH密切相关[1]，而脂联素受体(adiponectin receptor，AdipoR)在NASH发病中的表达变化及其意义目前并不清楚。本研究拟以高脂饮食诱导NASH大鼠，观察肝脏、骨骼肌及脂肪组织的AdipoR1、AdipoR2表达在NASH发病中的变化，初步探讨AdipoR1、AdipoR2在NASH发病中的作用。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    清洁级SD雄性大鼠20只，由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供，鼠龄4～5周，体质量150～180 g，饲养于上海同济医院试验动物中心，室温控制在22℃～26℃。动物基础饲料购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司，胆固醇纯品购自上海如吉生物科教有限公司，猪油市购，Trizol总RNA提取试剂盒购自美国Invitrogen公司，逆转录试剂盒购自立陶宛MBI公司。

    1.2 方法

    1.2.1 NASH动物模型构建[2]与分组：20只大鼠基础饲料喂养1周后随机分为2组，正常组(n=10)喂养基础饲料，模型组(n=10)喂养自配高脂饲料(88%基础饲料+10%猪油+2%胆固醇)，在第20周末大鼠隔夜禁食10 h，2%戊巴比妥钠45 mg/kg体质量腹腔注射麻醉，称体质量，股动脉放血处死，取血清、肝脏、骨骼肌及内脏白色脂肪组织保存备用。

    1.2.2 血生化指标检测：ADVIA1650全自动生化分析仪(Bayer公司)检测血清空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TCH)、甘油三酯(TG)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)等指标。

    1.2.3 荧光定量PCR检测AdipoR1、AdipoR2mRNA：⑴引物设计：参考文献[3]和Primer Premier5.0软件设计，由上海申能博彩生物科技有限公司合成。序列为：AdipoR1上游引物为5'-GCTGGCCTTTATGCTGCTCG-3'，下游引物为5 '-TCTAG GCCGTAACGGAATTC-3' ......