环氧和酶-2、基质金属酶-2、9 在子宫内膜息肉中表达和相关性研究
弱阳性,高水平,1资料与方法,1临床资料,2实验试剂,3实验方法,4结果判断标准,5统计学分析,2结果,1COX-2,MMP-2,MMP-9在绝经前,后子宫内膜息肉的表达差异,2MMP-2在子
曾 嫣,杨祖菁(上海交通大学医学院附属新华医院科研部,上海 200092)
子宫内膜息肉属子宫内膜良性病变,是导致子宫异常出血的常见病因。此病多见于35岁以上妇女,随年龄增加其发病率逐步上升。据国外报道发生率24%~25%[1],国内为5.7%[2]。近年来妇科检查及应用激素补充治疗人数的增多,子宫内膜息肉的检出率、发病率明显上升,且其存在癌变的可能性,文献报道年轻妇女的癌变率为0.5%~4.8%,更年期和绝经后妇女的癌变率达10%~15%。因而引发更多的关注。
环氧和酶-2(COX-2)、基质金属酶-2、9(MMP-2、9)在子宫内膜中的表达受到局部雌激素水平的影响[3]。本课题通过检测绝经前后子宫内膜息肉组织中环氧和酶-2、基质金属酶-2、9的表达,并与绝经后正常子宫内膜组织中COX-2及 MMP-2、9表达相比较,进行相关性研究。
1 资料与方法
1.1 临床资料
收集本院自2006年1月至2009年6月间经宫腔镜探查并取活组织检查,经病理诊断为子宫内膜息肉的完整病史资料按绝经与否分两组,各取30例。绝经前患者月经周期规则;绝经后患者闭经大于12月、FSH超过40Miu/L,E2低于50 pg/mL。所有患者均未使用非甾体类解热镇痛药、性激素类药物。同时选取正常子宫内膜共30例为对照组,此类内膜取自正常绝经后妇女因子宫脱垂或卵巢囊肿行全子宫切除标本,经病理诊断明确。
1.2 实验试剂
本研究采用的免疫组织化学试剂为COX-2及 MMP-2、9鼠抗单克隆抗体,购自上海长岛生物技术有限公司。抗体工作浓度为1:25。
1.3 实验方法
GnRHR免疫组化染色步骤:取存档石蜡制成4 um连续切片,60°C烤片。切片脱腊至水化。TBS洗涤2 min×3次。微波抗原修复(PH8.0 EDTA,PH7.4 Tris-cl配制的缓冲液)800W5 min×3次,取出后室温下冷却。TBS洗涤2 min×3次。加入GnRHR 抗体,室温过夜。次日再行TBS洗涤2 min×3次。滴加SupervisionTM-HRP,置入湿盒中,室温下1 h。滴加DAB显色液,显色50 min左右,显微镜下控制显色时间,自来水冲洗。苏木素复染30 s,自来水冲洗。脱水。透明:二甲苯I 15 min、二甲苯II 15 min。树胶封片,盖上玻璃片。
1.4 结果判断标准
观察阳性反应采用双盲法。GnRHR表达定位于与细胞质 ......
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