梁 毅 ，葛志红 ，丘和明

    (1.广州中医药大学第一附属医院，广东 广州 510405；2.广东省中医院，广东 广州 510120)

    清毒饮对K562细胞bcr/abl mRNA基因表达的影响

    梁 毅1，葛志红2，丘和明1

    (1.广州中医药大学第一附属医院，广东 广州 510405；2.广东省中医院，广东 广州 510120)

    目的 观察不同药物浓度清毒饮对人白血病细胞株K562细胞bcr/abl基因表达水平的影响，为临床应用清毒饮提供依据。方法 制备不同药物浓度清毒饮(5、10、20 mg/mL)含药血清并处理K562细胞48 h，提取细胞总RNA，采用实时荧光定量RT-PCR技术分析各组培养细胞bcr/abl mRNA表达的水平。结果 清毒饮中、高2种浓度清毒饮含药血清与对照组比较，对人白血病K562细胞株bcr/abl融和基因表达水平具有显著影响，差异有统计学意义(P<0.05，0.01)，且呈浓度依赖性。结论 清毒饮具有抑制人白血病 K562细胞株 bcr/abl mRNA表达的作用，提示清毒饮具有从分子水平抗肿瘤细胞增殖的效应。

    清毒饮；慢性粒细胞性白血病；K562细胞；bcr/abl；mRNA；大鼠；七叶一枝花；白花蛇舌草

    慢性粒细胞败血病(CML)是以费城染色体(Ph)为特征的多潜能干细胞异常的骨髓恶性增殖性疾病。Ph染色体是由9号染色体c-abl癌基因移位到22号染色体的bcr基因处，形成bcr/abl融和基因，该基因经转录后，编码8.5 kb的嵌合体mRNA。目前认为>95%的CML患者含有bcr/abl融和基因，该基因翻译成相对分子质量为210 kD的蛋白质，即P210bcr/abl融合蛋白，该蛋白具有异常活跃的酪氨酸激酶活性，并活化细胞内相关的信号通路从而调控细胞的分裂与增殖，与CML的发病密切相关[1-3]。中药清毒饮在多年的临床应用中，发现有良好的抗白血病细胞效果；有研究表明其具有明显的抗肿瘤细胞增殖的作用[4-5]；结合以往的研究成果，我们采用体外细胞培养及荧光定量RT-PCR方法，研究探讨了不同浓度清毒饮复方对人白血病K562细胞株的bcr/abl mRNA基因表达的影响，从分子生物学角度阐明了清毒饮抗白血病细胞的作用机制。现将实验方法及结果报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物 3月龄SD大鼠60只，雄性，体质量240～260 g，SPF级，由广州中医药大学实验动物中心提供。于广州中医药大学SPF级动物中心饲养 ......