大豆苷元对HEC-1B细胞增殖及雌激素受体报告基因表达的影响
荧光素酶,培养液,1材料和方法,2方法,3统计学分析,2结果,1大豆苷元对HEC-1B细胞体外增殖作用的量效关系,2大豆苷元对HEC-1B细胞体外增殖作用的时效关系,3大豆苷元对ERE调控的荧光素酶
刘小丽,薛晓鸥*,唐炳华,牛建昭(1.北京中医药大学东直门医院,北京 100700;2.北京中医药大学基础医学院科研中心,北京 100029)
大豆苷元对HEC-1B细胞增殖及雌激素受体报告基因表达的影响
刘小丽1,薛晓鸥1*,唐炳华2,牛建昭2
(1.北京中医药大学东直门医院,北京 100700;2.北京中医药大学基础医学院科研中心,北京 100029)
目的 探讨大豆苷元对子宫内膜癌细胞增殖的影响及其对雌激素受体报告基因表达的影响。方法 体外培养子宫内膜癌细胞子宫内膜癌雌、孕激素受体阴性细胞系(HEC-1B),采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测不同浓度大豆苷元对子宫内膜癌细胞增殖的影响,同时检测大豆苷元对雌激素应答原件(ERE)调控的雌激素受体α(ERα)和雌激素受体β(ERβ)的荧光素酶报告基因表达的影响。结果 大豆苷元对HEC-1B细胞体外增殖有明显抑制作用,差异有统计学意义(P<0.01),其抑制作用有明显量效和时效性特征。在浓度为20~80×10-6mol/L的大豆苷元作用下,报告基因luc的表达较正常对照组明显提高,差异有统计学意义(P<0.05),在80×10-6mol/L时到达最高值;大豆苷元通过ERβ介导的报告基因表达水平的升高程度强于ERα,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 大豆苷元可通过调节子宫内膜癌细胞ERα和ERβ介导的报告基因的表达,调整ERα/ERβ比例,从而抑制子宫内膜癌细胞的增殖。
大豆苷元;子宫内膜癌;细胞增殖;雌激素受体;四甲基偶氮唑盐法;报告基因
植物雌激素是一类结构和功能与雌激素相似的而源自植物的化合物,它具有与雌激素相似的酚环结构,能选择性地与雌激素受体结合,而选择性地发挥弱雌激素样和抗雌激素样活性。随着植物雌激素的发现,人们开始着力研究对其子宫内膜癌的治疗作用。大豆苷元是一种常见的植物雌激素之一,存在广泛,但对于大豆苷元的抗肿瘤及受体调节作用尚缺乏深入研究。本文就大豆苷元对HEC-1B细胞的体外抗增殖作用及受体调节作用进行研究,旨在探讨大豆苷元的抗肿瘤及其双向受体调节作用活性。现将实验方法及结果报道如下。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 细胞系与质粒 人子宫内膜癌细胞系HEC-1B细胞,购自协和医科大学基础医学院细胞中心,传代培养。β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)对照质粒pβ-gal-control购自CLONTECH 公司。重组报告基因载体pERE-TAL-luc是将5×ERE序列插入pTAL-luc质粒的多克隆位点(MCS)构建的重组报告基因载体质粒 ......
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