杨正望 ，文 炯 ，张增玲

    (1.湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙410007；2.湖南醴陵市中医院，湖南 醴陵 412200)

    补肾化瘀方对PCOS大鼠卵巢颗粒细胞CYP450表达的影响

    杨正望1，文 炯2，张增玲2

    (1.湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙410007；2.湖南醴陵市中医院，湖南 醴陵 412200)

    目的 观察补肾化瘀方对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞CYP450蛋白表达的影响。方法运用补肾化瘀方对PCOS模型大鼠进行干预后，采用免疫组化法观察卵巢颗粒细胞CYP450的蛋白表达。结果 模型组与正常组比较，卵巢颗粒细胞CYP450的蛋白表达在表达面积及表达强度上均低于正常组，差异具有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物 取23日龄(断奶后2 d)SD清洁级雌性大鼠 60 只，体质量(41±42)g，由湖南中医药大学动物实验中心提供，(合格证号：医动字20-004)，清洁级饲养，室温20～26℃，相对湿度40%～70%，噪声小于60 Db。全价营养颗粒饲养，清洁饮用水。

    1.1.2 药物 补肾化瘀方：补骨脂12 g，菟丝子12 g，桑寄生 10 g，茺蔚子 15 g，丹参 10 g，泽兰10 g，地龙 10 g，生鸡内金 6 g，甘草 3 g。对照药物：妈富隆，荷兰欧加农公司生产(批号：160445)；丙酸睾酮注射液：天津金耀氨基酸有限公司(批号：050108)；绒毛膜促性腺激素(HCG)：高科华泰制药(批号：0605042)。

    1.1.3 试剂 细胞色素P450免疫组化试剂盒(购自武汉博士德生物工程有限公司，批号：AR1022)。

    1.1.4 仪器 鼠用固定器，眼科解剖器械，医用微波炉，光学显微镜(西德 XDS-1A)；OPTMA56.51图像采集系统(德国Ziess)。

    1.2 方法

    1.2.1 药物制备 补肾化瘀方的制备:称取原中药材88 g，用水浸泡后浓煎取汁，由湖南中医药大学药学院药剂实验室统一制备成药物浓度每毫升含生药2.5、5、10 g低、中、高3个不同剂量，分别相当于50 kg成人用药等效剂量2.5、5、10倍。对照药制备：将1片妈富隆溶于50 mL蒸馏水中，按50 kg成人用药等效剂量0.6 mL/100 g灌服。

    1.2.2 动物模型制备及分组 按文献[3-4]使用雄激素联合HCG制作大鼠PCOS病理模型，取23日龄(断奶后2 d)SD清洁级雌性大鼠66只 ......