伍参荣 ，蔡 锐 ，李 珊 ，申可佳 ，贾本真 ，李芳荣

    (1.湖南中医药大学病原免疫学教研室，湖南 长沙 410208；2.湖南中医药研究院，湖南 长沙 410006)

    结核病是一种慢性传染病，近20年来，由于艾滋病的传播以及耐药等因素的影响，全球结核发病率呈上升势。目前认为，耐药性结核分枝杆菌广泛传播是结核病流行的主要原因[1]，临床上已发现结核分枝杆菌菌株对多种一线抗结核药物耐药[2]，因此，研制新型抗结核药物有其必要性，从中药中筛选抗结核新药是其有效途径之一。黄葵素是从天然药物中筛选出的新型化合物—小檗碱离子对化合物 (专利号：200510136655)，研究中发现该药能抗多种病原体，特别是抗胞内菌感染。现将其抗结核杆菌研究结果报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 试验菌株 H37RV标准菌 (ATCC：27294)本室保存菌株； 多药耐药菌株(INH/R，SM/R，RFP/R，EMB/R，KA/R，IRO/R)编号 005101 由湖南省结核病院检验科提供。从培养基中称取0.1 mg菌落，加入0.5 mL生理盐水与苏通培养液(体积比为1∶3)的混合稀释液分别接种于改良罗氏培养基[3]斜面上。置37℃培养。18 d后分别取改良罗氏培养基上生长良好的菌落于研磨器中，加少量含0.05%Tween80的生理盐水研磨均匀，稀释成白色均匀混浊的菌液。显微镜下计数，调整细菌浓度为3×107个/mL(供试验用)。

    1.1.2 试验药物 黄葵素干粉由湖南中医药研究院药物研究所提供，批号：20070212，用含2%乙醇生理盐水稀释成1 g/mL，4℃保存备用。利福平胶囊(0.3 g/粒，浙江医药股份有限公司新昌制药厂，批号：20061209001)，实验时先用少许乙醇溶解，再用无菌蒸馏水稀释至5 mg/mL。

    1.1.3 动物 KM小鼠70只，SPF级体质量 (18.0±2.0)g雌雄各半，购自湖南莱克景达实验动物有限公司，许可证号：SCXK2009-0004。 饲养于(21±2)℃、湿度(55±15)%、可以方便获取食物和水的负压感染动物房内。

    1.2 方法

    1.2.1 体外抗菌实验[3-4]改良罗氏培养基分别制成含药和不含药平皿，即：不含药的空白对照组；阳性对照组 (利福平5 mg/mL)；含不同浓度黄葵素组(100，50，25， 12.5，6.2，3.2 mg/mL)，各组培养基每平皿15 mL。取上述菌悬液0.1 mL接种于各含药培养基表面 ......