益肾调周法对卵巢早衰模型大鼠卵巢储备能力的影响
低剂量,1材料和方法,2给药方法,3统计学分析,2结果,3讨论,1评价卵巢储备能力的指标选择,2疗效机制探讨
王 浩(湖南中医药大学研究生院,湖南 长沙 410208)
卵巢功能早衰(premature ovarian failure, POF)是妇科的常见病之一,在一般人群中患病率为1%~3%,在40岁之前的发病率为1%,30岁之前为1‰,且发病率呈逐年上升的趋势[1]。POF不仅可直接导致患者不孕、月经稀发、最终闭经,并且病程中常常伴随着烦躁、抑郁、甚至敌对等情绪改变,同时内外生殖器官及第二性征逐渐萎缩及退化[2],并引起脂质代谢紊乱,诱发高脂血症、动脉硬化、冠状动脉粥样硬化性心脏病等。因此,POF的防治是当今生殖医学研究的重点及难点。女性生育功能主要体现在卵巢的储备能力上(ovarian reserve),所以如何准确预测卵巢储备能力,亦是防治POF的重要指标。本研究以付霞霏、何援利(2008年)建立的《化疗所致卵巢早衰动物模型的建立》为基础,旨在观察益肾调周法对卵巢储备能力的影响,探讨其量效关系及作用机理,为中药防治POF提供科学有效的思路和方法。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 动物 SPF级健康雌性8周龄SD大鼠135只,质量180 g士20 g,由河南省动物实验中心提供。动物合格证号:SCKx-(豫)2010-002。饲养室温控制在20~25℃,光照12 h,采用分笼架式喂养,标准饲料,饮水为自来水。
分组 将135只大鼠按质量分层随机(随机数字表法)分组,随机分为9组,即空白对照组(A)、模型对照组(B)、克龄蒙对照组(C)、滋肾填精汤高剂量组(D1)、滋肾填精汤低剂量组(D2)、温肾填精汤高剂量组(E1)、温肾填精汤低剂量组(E2)、益肾调周法高剂量组(F1)、益肾调周法低剂量组(F2),每组15只,分笼常规喂养。
1.1.2 实验药物 滋肾填精汤(熟地,黄精,女贞子,白芍,当归,淮山药,山茱萸,川芎,合欢皮,炙甘草),由河南中医学院药理实验室制备,采用乙醇回流提取法,调整至含生药2 g/mL。
温肾填精汤(菟丝子,淫羊藿,仙茅,桑寄生,川断,巴戟天,何首乌,黄精,合欢皮,杜仲,木香,炙甘草),由河南中医学院药理实验室制备,采用乙醇回流提取法,调整至含生药2 g/mL。
克龄蒙(Climen):拜耳医药保健有限公司,片剂,21片/盒。
1.1.3 主要试剂 环磷酰胺(Cyclophosphamid,CTX):山西普德药业有限公司,粉剂,200 mg/支。
大鼠雌二醇(E2)放免试剂盒,(上海劲马) ......
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