刘慧萍 ，尤昭玲 ，张国民 ，刘春燕 ，王宏宝 ，肖 艺 ，吴 霞 ，庄 乔 ，黄珍琦 ，雷 磊 *

    (1.湖南中医药大学分子病理与药理实验室，湖南 长沙 410208；2.湖南中医药大学湘杏学院2008级中西医结合专业，湖南 长沙 410007)

    补肾活血方对免疫性卵巢早衰小鼠卵泡凋亡相关蛋白的影响

    刘慧萍1，尤昭玲1，张国民1，刘春燕1，王宏宝1，肖 艺1，吴 霞1，庄 乔2，黄珍琦2，雷 磊1*

    (1.湖南中医药大学分子病理与药理实验室，湖南 长沙 410208；2.湖南中医药大学湘杏学院2008级中西医结合专业，湖南 长沙 410007)

    目的 研究补肾活血方对卵巢早衰(POF)小鼠卵泡凋亡调控相关基因的表达，为临床中医药预防和治疗卵巢早衰提供思路。方法 采用透明带3作抗原，对BALB/c雌性小鼠皮下多点注射，建立免疫性POF模型。用补肾活血方低、中、高剂量进行治疗，设倍美力为阳性对照药，采用ELISA法测定外周血清抗透明带抗体(AzpAb)的含量，进行脏器指数及卵巢病理学观察，免疫组织化学SABC法检测卵泡凋亡调控基因(bcl-2/Bax)表达变化。结果 与空白组比较，模型组AzpAb表达明显增高，差异有统计学意义(P<0.01)；与模型组比较，各剂量组、倍美力组表达均明显下降，差异有统计学意义(P<0.01)；与空白组比较，模型组卵巢指数、胸腺指数均明显下降，脾脏指数明显增加，差异有统计学意义(P<0.01)，与模型组比较，高剂组和倍美力组卵巢指数(P1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物 健康雌性Balb/c小鼠60只，体质量(20±0.2)g，SPF 级，8 周龄， 广东省医学实验动物中心提供，合格证：2008A023。在湖南中医药大学实验动物中心IVC笼具分笼喂养，自由饮水摄食，保持每天12 h明、12 h暗环境。

    1.1.2 药物 补肾活血方：补骨脂、紫石英、菟丝子、生熟地、桑寄生、覆盆子、山萸肉、土鳖虫、水蛭、鸡内金、路路通、泽泻、泽兰、桔梗、乌药、甘草，由湖南中医药大学第一附属医院中药房提供。倍美力：惠氏制药有限公司。

    1.1.3 试剂 小鼠透明带多肽溶液：小鼠透明带3(ZP3)第330-342个氨基酸序列(NSSSSQFQIHGPR)，分析纯度>90%，杭州中肽生化有限公司，批号：P00105。弗氏完全佐剂和弗氏不完全佐剂：美国 Sigma公司，批号：F5881、F5506。 小鼠抗透明带抗体酶联免疫分析试剂盒：美国USCNLIFE公司 ......