湿痹通对大鼠急性痛风性关节炎模型抗炎作用机制的探讨
秋水仙碱,造模,1材料与方法,2方法,3统计学分析,2结果,1各组大鼠炎症指数及功能障碍指数积分比较,2各组大鼠血清中IL-1及IL-1R含量的比较,3各组大鼠关节软组织中IL-1β,IL-1R表达的比较,3
姚 红,杨飞燕,刘昌盛,陈瑞旦,童 娟(广州医学院第一附属医院,广东 广州510120)
痛风性关节炎(gouty arthritis)又称为尿酸性关节炎,是由尿酸钠(monosodiumurate,MSU)在关节腔内形成微晶体沉淀,引起非特异性关节炎症,痛风最常见的表现形式是以关节红肿热痛的炎症反应为主[1],属于中医学“痹症”之风湿热痹范畴。现代医学研究显示:急性痛风性关节炎发作与自身免疫介导的免疫炎症反应有关。在痛风性关节炎急性发作时,尿酸盐晶体刺激血液中单核细胞和关节滑液中的多形核白细胞引起白介素-1(interleukin-1 IL-1)的大量释放是急性痛风性关节炎发作的特点,故IL-1 是急性痛风性关节炎的一个重要炎症介质[2],关节内主要是以白细胞介素-1β(IL-1β)形式存在,在痛风性关节炎的发病过程中起重要作用[3]。但关于中医药治疗痛风性关节炎的实验研究中,重点往往关注药物对人体内血尿酸浓度的影响,而忽略了中药抗炎作用的效应。本实验用尿酸钠晶体注射大鼠踝关节内诱导急性痛风性关节炎模型,主要观察湿痹通对模型大鼠关节炎症程度、血清内及关节内IL-1 及IL-1R 水平的影响,现将实验方法及结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物 Wistar 大鼠40 只,雄性,180~200 g(由南方医科大学实验动物中心提供,生产许可证号为scxk 粤2006-0015),饲养环境:广州医学院实验动物中心SPF 级实验室(许可证:4402100561)。
1.1.2 药物 湿痹通由广州医学院第一附属医院制剂室提供(为院内制剂,由七叶莲、土茯苓、萆薢组成,经煎煮后减压浓缩至2 g/mL,冰箱保存备用)。秋水仙碱(50 mg/片,西双版纳药业有限公司生产,No.H53021369)。
1.1.3 试剂 尿酸钠(美国Sigma 公司);大鼠IL-1及白细胞介素-1R(IL-1R)ELISA 试剂盒(购自深圳晶美生物工程有限公司);大鼠免疫组化试剂盒(购自广州杰特伟生物科技有限公司),抗IL-1β 抗原(ab109555 Abcam 抗体),抗IL-1R 抗原(ab106278 Abcam 抗体),DAB 显色试剂盒。
1.1.4 仪器 DF-110 型电子分析天平(德国Sartorius 公司生产);游标卡尺 (上海实业有限公司生产);光学显微镜(日本Olympus 公司生产);pH 计(编号DECTA320,瑞士梅勒公司生产);套式恒温器(GB2292 型 ......
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