王 立，梁清华，陈晓玲，阳 历，唐 科，刘建军，贝玉章

    (1.浏阳市集里医院神经内科，湖南 浏阳430100；2.中南大学湘雅医学院中西结合研究所，湖南 长沙410008)

    蛋白质组学研究基因的最终表达产物是具有活性的蛋白质，以蛋白质双向电泳和新型质谱分析为技术平台，同条件和状态下蛋白质组的性质和变化规律，是后基因组时代的研究重点。目前脑梗死的发生机制虽然复杂，但归纳起来不外虚(阴虚、气虚)、火、风、痰、瘀几个方面。有人从脑梗死患者四诊信息和检测指标的搜集，运用聚类分析、对应分析、因子分析和结构方程等统计方法，初步将本病分为风瘀证、阴虚证、气虚证、火热证、痰湿证，然而脑梗死证的本质研究还没有确切结论。为进一步探讨脑梗死各种证型之间关联因素，本实验采用双向凝胶电泳分离脑梗死肝阳化风证与阴虚风动证血清，用PD-QUES 分析2D电泳图谱，基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS) 分析获取肽质量指纹图谱(PMF)，Mascot 软件检索SwissProt 数据库鉴定蛋白质点，从蛋白质组学角度比较脑梗死肝阳化风证与阴虚风动证，从更深层次阐明脑梗死肝阳化风证与阴虚风动证，研究其蛋白质组成成分、表达水平与修饰状态，阐明脑梗死肝阳化风证与阴虚风动证的病理生理机制。

    1 资料与方法

    1.1 临床资料

    实验组：脑梗死肝阳化风证与阴虚风动证患者为2010年2月至2011年10月浏阳市集里医院门诊及住院病人。其诊断标准参照第六版《神经内科学》脑梗死诊断标准[1]。肝阳化风证与阴虚风动证辨证标准参照中南大学湘雅医学院中西结合研究所制定的标准[2]：肝阳化风证 眩晕欲倒，肢麻，手足震颤，语言謇涩，半身不遂。阴虚风动证 手足蠕动或筋肉掣动，午后潮热，盗汗，口干咽燥，形体消瘦。共收集病例32 例，其中男性17 例，女性15 例；年龄41～68 岁，平均年龄(52.7±8.1)岁。对照组：10 例均为健康者，其中男性6 例，女性4 例；年龄40～64 岁，平均年龄(52.7±6.9)岁。全部病例均排除心、肝、肾等功能不全者，有活动性胃肠病变者，血液及内分泌系统疾病者，过敏体质者，孕期或哺乳期妇女。

    1.2 方法

    1.2.1 试剂 二硫苏糖醇(DTT)、碘乙酰胺、双向凝胶电泳标准蛋白质、甲苯磺酰苯丙氨酰氯甲-酮-胰蛋白酶、碳酸氢铵、三氟乙酸、乙睛和基质а-氰基-4-羟基肉桂酸均为Sigma 公司产品 ......