申可佳，熊 桀，尤昭玲，雷 磊，邱苒苒，游 卉，付灵梅

    (1 湖南中医药大学，湖南 长沙410208；2 湖南中医药大学附属一医院，湖南 长沙410208)

    卵巢内颗粒细胞-卵母细胞及颗粒细胞-卵泡膜细胞的信号交流是卵母细胞发育成熟的重要条件，颗粒细胞及卵泡膜细胞的生长或凋亡对卵泡发育及卵母细胞的质量起着举足轻重的作用。我们的前期工作发现护卵汤能改善促性腺激素释放激素(GnRHa)超排卵大鼠的卵泡发育及卵子质量，影响体内生殖激素水平[1-2]，本实验进一步观察护卵汤对GnRHa 超排卵大鼠卵巢细胞凋亡及妊娠结局的影响。现将实验方法及结果报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物 健康8 周龄SPF 级雌性SD 大鼠90只，体质量为180～220 g。第3 周购入成年雄性大鼠20 只。以上动物均由湖南中医药大学动物实验中心提供，动物合格许可证号：SCXK(湘)2009-0004。

    1.1.2 药物 护卵汤颗粒，由广东一方制药有限公司生产提供，每剂的总质量为17.1 g，相当于生药量116 g(熟地黄10 g，生地黄10 g，沙参10 g，石斛10 g，山药10 g，莲子肉10 g，桑椹子10 g，覆盆子10 g，菟丝子10 g，月季花10 g，莲心3 g，肉苁蓉10 g，甘草3 g)；注射用促性腺激素释放激素(Gn-RHa)：马鞍山丰原制药有限公司生产，批号1005265；注射用尿促性腺激素(HMG)：中国丽珠集团丽宝生物化学制药有限公司生产，批号1007234；注射用绒毛膜促性腺激素(HCG)：中国丽珠集团丽宝生物化学制药有限公司生产，批号1006137。

    1.1.3 试剂 细胞凋亡检测试剂盒，4%多聚甲醛，磷酸盐缓冲液(PBS)，蒸馏水 ......