欧 松，孙克伟，彭建平，祁双林，闻 杰，胡 莉

    (湖南中医药大学第一附属医院，湖南 长沙410007)

    乙型肝炎病毒(HBV)感染后慢性乙型肝炎患者外周血免疫细胞均存在着免疫功能缺陷或低下，其中，以T 淋巴细胞功能低下为中心的细胞免疫功能障碍导致的免疫耐受是HBV 持续感染、慢性乙型肝炎难以治愈的主要原因[1]。既往研究表明中医药在改善机体免疫状态，恢复和提高免疫细胞功能，重建免疫应答具有较好的作用[2-4]。针对HBV 慢性感染其外因是湿热疫毒内侵，内因归属脾、肾二脏亏虚[5]，本研究拟运用HBV 感染免疫耐受期与免疫清除期患者外周血T 细胞体外培养的细胞模型和中药血浆药理实验方法，比较补肾解毒方和健脾解毒方对HBV感染不同免疫状态患者的外周血T 细胞功能的影响，为临床提高中医药治疗慢性乙型肝炎的疗效提供指导思路和研究基础。

    1 材料与方法

    1.1 动物

    SPF 级SD大鼠30只，雌雄各半，41 d 龄，(164.2±10.6)g，湖南中医药大学动物学部提供，使用许可证号：SCXK (湘)2009-0004。实验大鼠于2010年9月24日至2010年10月6日在湖南中医药大学动物学部SPF 级饲养房喂养。

    1.2 药物

    补肾解毒方：六味地黄丸(《小儿药证直诀·卷下》[6])加甘露消毒丹(《温热经纬》[7])化裁：熟地黄24 g，山药12 g，山茱萸12 g，泽泻9 g，茯苓9 g，牡丹皮9 g，白蔻仁10 g，藿香10 g，茵陈15 g，滑石30 g，石菖蒲10 g，黄芩10 g，连翘10 g，川贝母10 g，射干10 g，薄荷6 g；健脾解毒方：四君子汤(《太平惠民和剂局方》[8])加甘露消毒丹化裁：人参、白术、茯苓、炙甘草各9 g，白蔻仁10 g，藿香10 g，茵陈15 g，滑石30 g，石菖蒲10 g，黄芩10 g，连翘10 g，川贝母10 g，射干10 g，薄荷6 g。饮片均采用道地药材，由长沙九芝堂股份有限公司提供，由湖南中医药大学第一附属医院制备，补肾解毒小、中剂量组分别含生药1.94、9.71 g/mL；健脾解毒小、中剂量组分别含生药1.58、7.92 g/mL。

    1.3 试剂与仪器

    BS 缓冲液：天津津脉；淋巴细胞分离液：天津灏洋公司；RPMI1640：吉诺生物医药技术有限公司；10%胎牛血清(FCS)：美国Hyclone 公司；1%多聚甲醛:天津市化学试剂研究所；荧光抗体CD3-Percp(多甲藻叶绿素蛋白) ......