王维益，刘建博，郭 敏，蔡俊翔，雷 源

    (1.广州中医药大学，广东 广州501405；2.广州中医药大学第一附属医院，广东 广州501405)

    现代医学认为，哮喘是由多种细胞包括气道的炎性细胞和结构细胞(如嗜酸粒细胞、肥大细胞、T淋巴细胞、平滑肌细胞、气道上皮细胞等)和细胞组分参与的气道慢性炎症性疾病[1]，其原因是气道发生了重构[2]，其中支气管平滑肌细胞(ASMC)增殖在气道重构中占有十分重要的地位。本实验拟通过MTT法及流式细胞术检测分析加减射麻止喘汤对哮喘大鼠ASMC 增殖的干预作用，为支气管哮喘的进一步防治提供一定的实验依据。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物 SPF 级SD 雄性大鼠，体质量250～300 g，35 只，合格证号：0080764 0077574，许可证号：scxk(粤)2008-0020，广州中医药大学动物实验中心提供。

    1.1.2 加减射麻止喘液汤方药 射干，地龙，椒目，北杏仁，法半夏，桔梗，细辛，甘草，质量比为1∶1.2∶1∶0.6∶1.2∶1.2∶0.6∶0.6，按传统煎药法制成含生药为1.48 g/mL 的水剂。

    1.1.3 试剂 注射用青霉素钠(批号：Y1203411)、注射用硫酸链霉素(批号：1009104)购于广州中医药大学第一附属医院；鸡卵清蛋白(批号：9006-59-1)、氢氧化铝(批号：21645-51-2)购于广州齐云生物技术有限公司；PMA(批号：1626450)购于LClabs 公司；Ro-31-8220(批号：sc-200619)购于Santa Cruz 公司；核糖核酸酶(RNA 酶)(批号：182651301)、四甲基偶氮唑盐(MTT)(批号：132613903)购于Sigma 公司；木瓜蛋白酶(批号：1626405)购于Merck 公司；胶原酶I型(批号：17100-017)购于Gibco 公司；DMEM 高糖培 养 液 (批号：GNM12800)、胰蛋白酶 (批号：SH30042.01)、PBS 缓冲液(批号：GNM200120)、胎牛血清(FBS)(批号：SV30087.01)购于Hyclone 公司；碘化丙啶(PI)(批号：95458)、二甲基亚砜(DMSO)(批号：196055)、牛血清白蛋白(BSA)(批号：021624104)购于广州威佳科技有限公司 ......