金 玲，何小进，尹玲桃，江兴林*

    (湖南怀化医学高等专科学校诊断教研室，湖南 怀化 418000)

    神经节苷脂对脑瘫大鼠大脑皮质区Nestin、NGF表达的影响

    金 玲，何小进，尹玲桃，江兴林*

    (湖南怀化医学高等专科学校诊断教研室，湖南 怀化 418000)

    目的观察神经节苷脂(GM1)对脑瘫大鼠大脑皮质区神经巢蛋白(Nestin)、神经生长因子(NGF)表达的影响，探讨GM1促进脑瘫神经修复的可能机制。方法选择出生10周雄性SD大鼠200只，随机分为3组：假手术组60只，脑瘫模型140只，再分为模型组70只，腹腔注射生理盐水；GM1组70只，腹腔注射GM1。分别在术后0～24 h的7个时间点利用酶联免疫法检测大鼠大脑皮质区Nestin、NGF表达情况，并在实验前和后1～4 d观察大鼠的体质量变化情况。 结果 (1)大鼠大脑皮质区 Nestin表达 GM1组 0～24 h、模型组 0～12 h明显高于假手术组(P1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物 选取出生10周并经适应性喂养3 d至体质量在200～250 g的健康雄性SD大鼠200只(来源于湖南斯莱克景达实验动物有限公司，许可证书号：SCXK(湘)2011-0003)。适应性喂养采用的饲料及屏蔽环境实验设施由中南大学实验动物中心(SPF级)提供，在光/暗周期为12 h/12 h(光照时间7：00-9：00)的条件下饲养于笼中，自由获得饲料和饮水。

    1.1.2 药物 GM1，商品名“申捷”，北京四环制药有限公司生产，药品批准文号：H20083224，生产批号：4010531，注射剂，2 mg/mL。

    1.1.3 主要仪器和试剂 采用芬兰352型352017148酶标分析仪，芬兰AC8型洗板机；NGF酶联免疫分析试剂盒、Nestin酶联免疫分析试剂盒，均购自北京永辉生物科技有限公司。

    1.2 方法

    1.2.1 造模与分组 造模方法按楚胜华等[3]运用特制的造模打击装置，以自由落体撞击建立动物脑瘫模型。将200只大鼠随机分为假手术组60只，GM1组和模型组各70只。大鼠造模前禁食8 h，实验时将大鼠俯卧位固定于脑立体定向仪上，消毒头部皮肤，按以10%水合氯醛按0.35 g/kg进行腹腔内注射麻醉，正中切开头皮后剥离骨膜，充分暴露右顶骨，用牙科钻在冠状缝后1.5 mm、中线旁2.5 mm处钻一直径5 mm的骨窗，并保持硬膜完整。假手术组：不施加砝码撞击即封闭头皮，未致脑瘫；模型组和GM1组：用20 g砝码于30 cm高处坠落 ......