辣椒素及二氢辣椒素对神经胶质瘤C6细胞和骨肉瘤ROS 17/2.8细胞的抑制作用
抑制率,培养液,1材料与方法,1主要试药与仪器,2方法,3统计学分析,2结果,1CCK-8法检测辣椒素及二氢辣椒素对大鼠神经胶质瘤C6细胞的抑制作用,2CCK-8法检测辣椒素及二
谢 乐,周 慎*,伍大华,刘 冬,向光红,唐 涛,唐劲天(1.湖南中医药大学研究生院,湖南 长沙410208;2.湖南省中医药研究院附属医院脑病科,湖南 长沙410006;3.贵阳中医学院,贵州 贵阳550002;4.湖南省脑科医院神经内科,湖南 长沙410007;5.北京大北农科技集团股份有限公司饲用微生物工程国家重点实验室,北京100192;6.清华大学工程物理系医学物理与工程研究所,北京100084)
辣椒被亚洲和南美洲等世界各地广泛食用,其产生辣味的物质统称为辣椒素类似物, 属于香草酰胺类生物碱,包括辣椒素(Capsacin,Cap)、二氢辣椒素(Dihydrocapsaicin,DHC)、高辣椒素、高二氢辣椒素、降二氢辣椒素等。 其中辣椒素以及二氢辣椒素是辣椒呈辣味的主要成分, 占辣椒素类似物的90%[1]。现代药理学研究表明辣椒素以及二氢辣椒素能镇痛、抗炎、止痒、降压、调脂及抗癌等[2-3],随着研究的深入, 辣椒素抗肿瘤作用正逐渐成为研究的热点。已有研究报道辣椒素对肝癌、乳腺癌、胰腺癌、前列腺癌等[4-6]多种癌细胞具有抑制作用,本文报道辣椒素及二氢辣椒素对大鼠神经胶质瘤C6 细胞、 骨肉瘤ROS 17/2.8 细胞增殖的影响,并对其机制进行初步探讨。
1 材料与方法
1.1 主要试药与仪器
辣椒素、二氢辣椒素(美国sigma,纯度99%);大鼠神经胶质瘤C6 细胞、骨肉瘤ROS 17/2.8 细胞(中国医学科学院基础医学研究所细胞中心);DMEM 培养基(美国Gibco BRL)、牛胎血清、L-谷氨酰胺、HEPES、 二甲基亚砜(美国Thermo 公司)、CCK-8(日本同仁化学研究所)、活性氧检测试剂盒(碧云天生物技术研究所)、Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒(南京凯基生物科技发展有限公司)、CO2细胞培养箱(美国Thermo 公司)、酶联免疫检测仪 (美国BIO-RAD 公司,BIO-RAD 680 型)、BD Calibur 型流式细胞分析仪(美国BD 公司)。
1.2 方法
1.2.1 细胞培养 将C6、ROS17/2.8 细胞接种于含10%胎牛血清、2 mmol/L L-谷氨酰胺、2 mmol/L HEPES 的DMEM 培养基中。 在37 ℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中培养,取对数期生长良好的细胞进行实验。
1.2.2 CCK-8 法检测辣椒素及二氢辣椒素对C6 细胞、ROS17/2.8 细胞的抑制作用 辣椒素以及二氢辣椒素分别溶解于含0.5%DMSO 的DMEM 培养基中 ......
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