郭 乐，潘 坤，尹 胜，杨军辉*

    (湖南中医药大学，湖南 长沙410208)

    心肌缺血是由于心脏的血液灌注减少，从而影响心脏的供氧， 缺氧状态下心肌能量代谢异常，导致无法支持心脏正常工作的一种病理状态。 近年来一些学者提出了“治疗性血管新生”的新途径，也就是通过某些药物的干预，增加冠状动脉分支或侧枝循环，从而达到恢复缺血心肌血供，改善患者症状和预后的目的， 但是目前这种设想仅处在研究阶段， 因此通过治疗性血管新生减轻心肌缺血损伤，逐渐成为目前研究的热点[1]。 而越来越多的证据表明，中药可从降低心肌耗氧、清除氧自由基、抑制钙超载、抑制细胞凋亡、促血管生成等不同途径起到抗心肌缺血的作用[2]，因此中医药在“治疗性血管新生”的新途径方面表现出了临床优势。 我们的实验通过观察益气活血汤对大鼠缺血心肌在Ras/Raf/MEK/ERK 信号级联通路中重要分子的影响， 探讨中医药的益气活血促血管生成作用。 现将实验方法及结果报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 动物 清洁级健康Wister 大鼠64 只，雄性，体质量为270～290 g， 由湖南中医药大学动物房提供，实验动物许可证号：SCXK(湘2009-0012)，购自长沙市天勤生物技术有限公司。

    1.1.2 药物与试剂 益气活血汤处方组成： 党参20 g，黄芪30 g，丹参20 g。药物购自湖南中医药大学第一附属医院中药房，经水煎2 次过滤，合并煎液，浓缩至含生药2 g/mL，冰箱贮存备用。倍他乐克(metoprolol)，由阿斯利康制药有限公司生产，批号为1308102。C-Raf-1 兔源性单克隆抗体由武汉博士德生物工程有限公司提供；Ras、p-ERKl 兔源性单克隆抗体由北京博奥森生物技术有限公司；ERK1 兔源性单克隆抗体由中杉金桥工程有限公司提供。

    1.1.3 主要仪器 XD-7100 型动物心电图机，上海医疗器械高技术公司；KD2258 轮转式石蜡切片机，金华益迪医疗设备公司；BX43 研究型显微镜，奥林巴斯集团；TP-8 组织摊片机， 久圣医疗设备有限公司；MIAS 医学图像分析管理系统，麦克奥迪实业集团有线公司。

    1.2 方法

    1.2.1 造模方法 按文献[3]的方法进行造模。 大鼠麻醉后固定，气管插管，连接人工动物呼吸机支持呼吸， 从胸骨左侧第3、4 肋间正中线旁开5 mm 行纵向切口 ......