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编号:443825
哮喘血清诱导气道上皮细胞中MAL的表达及柴朴汤干预的影响
http://www.100md.com 2015年11月27日 湖南中医药大学学报 2015年第3期
重塑,批号,1材料与方法,2方法,3指标检测,4统计学分析,2结果,1两组大鼠的组织病理学观察,2各组MALmRNA和蛋白表达的比较,3各组大鼠气道上皮细胞中MAL蛋白的表达,3讨论
     刘 鑫,夏 之,罗晓青,熊 花

    (1.南华大学附属第一医院中医科,湖南 衡阳421001;2.南华大学第一临床学院,湖南 衡阳421001;3.益阳市中心医院呼吸内科,湖南 益阳413000)

    支气管哮喘是一种临床上较为常见的疾病,其发病机制尚不完全清楚。 目前研究表明,支气管哮喘的病变主要是以气道慢性炎症、 气道高反应性及气道重塑为主,其中,气道重塑与哮喘症状的严重性、临床疗效及预后有密切关系[1]。 气道上皮细胞的增殖以及纤维化是气道重塑的重要组成部分, 而T 细胞成熟相关蛋白 (T-lymphocyte maturation associated protein T,MAL)有着维持上皮细胞稳定性的作用,研究表明,MAL 随着大鼠哮喘病程的进展,表达动态下调[2]。 明代王肯堂《证治准绳》的柴朴汤,由小柴胡汤和半夏厚朴汤组成,有行气、化痰、平喘的作用。 本研究旨在探讨柴朴汤对哮喘气道上皮细胞中MAL 表达的影响,现将结果报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 健康雄性SD 大鼠64 只(南华大学动物部提供),体质量(250±10) g。 动物许可证号:scxk (湘)2009-0012, 饲养室温维持在18~22 ℃之间, 相对湿度40%~70%, 饲养环境合格证号:scxk(湘)2009-0010,按标准化饲养,喂全价营养饲料,每日2~3 次按时喂养,每天更换饮用水源。

    1.1.2 主要试剂 卵蛋白(OVA,美国Sigma 公司,批号:120602);氢氧化铝粉末(天津生化试剂厂,批号:120802);小鼠MAL 抗体(博士德生物技术有限公司,批号:20120818);SABC 免疫组化试剂盒 (博奥森生物技术有限公司, 批号:20120713);DAB 显色试剂盒 (博奥森生物技术有限公司, 批号:20120728);MAL PCR 引物[生工生物工程(上海)股份有限公司,批号:E·129911,上游引物:5-CAG AGC AAT TAA CTG GTC AGC CT-3, 下游引物:5-GGA AGT TAA ATT CAG CAA GCC CT-3];RNA 提取试剂盒 (东盛生物技术有限公司, 批号:00073758);RNA 样本保存液 (天根生物, 批号:00084763)。

    1.1.3 试药 中药柴朴汤:由柴胡、半夏、茯苓、黄芩、厚朴、大枣、白参、甘草、苏叶、生姜中药配方颗粒组成,按7∶5∶3∶3∶3∶3∶2∶2∶2∶1 比例配制 ......

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