夏 丹，李勇敏，谭小宁，匡 朝，郭建生*

    (1.湖南中医药大学药学院，湖南 长沙410208；2.湖南省教育厅中药现代化研究重点实验室，湖南 长沙410208；3.湖南省中医药研究院，湖南 长沙410006)

    肺癌是发病率、 死亡率最高的恶性肿瘤之一[1]，严重威胁人类健康和生命。 手术、放疗、化疗是目前治疗肺癌的主要手段，但易复发转移，而中医药疗法在防治肺癌复发转移方面具有独特的优势。 肺复康为湖南省中医药研究院附属医院制剂，具有益气养阴、化瘀解毒的功效，临床上已取得了较好的疗效， 但对其具体的作用机制尚无深入研究。 本研究拟建立小鼠Lewis 肺癌移植瘤模型， 探讨肺复康抗肺癌生长及转移的分子机制，为其治疗肺癌及防治肺癌转移的临床运用提供科学依据。

    1 材料

    1.1 动物与瘤株

    SPF 级C57BL/6 小鼠48 只， 体质量18～22 g，雌雄各半，由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供，许可证号SCXK(湘)2011-0003。 小鼠Lewis 肺癌细胞株，由中南大学湘雅细胞中心提供。

    1.2 药物

    肺复康方由白参10 g，黄芪10 g，沙参10 g，麦冬10 g，生地黄10 g，女贞子10 g，灵芝10 g，夏枯草15 g，莪术9 g，白花蛇舌草20 g，重楼10 g，甘草5 g 组成。生药煎煮后，浓缩，70%乙醇提纯，得干浸膏，备用，1 g 浸膏相当于3.58 g 生药(由湖南省中医药研究院附属医院提供)。 5-氟尿嘧啶 (5-Fu)， 由上海旭东海普药业有限公司提供， 批号FA120701。

    1.3 试剂

    RIPA 裂解液(北京普利莱基因技术有限公司)；Tris(美国Sigma)；十二烷基硫酸钠(SDS)(美国Sigma)；Super ECL Plus 超敏发光液(Thermo pierce)；兔抗E-cadherin 单克隆抗体(ab133597)、兔抗Vimentin 多克隆抗体(BS1855)、兔抗TGF-β 多克隆抗 体 (Ab66043)、 小 鼠 抗β-actin 单 克 隆 抗 体(60008-1-Ig)、 羊抗兔IgG-HPR、 羊抗小鼠IgGHPR，均由Proteintech 公司提供。

    1.4 仪器

    DY89-1-电动玻璃匀浆器(宁波新芝生物科技股份有限公司)；DYY-6C-电泳仪、DYCZ-24EN-电泳槽、DYCZ-40A-转膜仪， 均由北京六一仪器厂提供 ......