杨 丽，张炳填*，湛锦源，肖秀琦，何 栋

    (1.湖南中医药大学，湖南 长沙410208；2.湖南长沙医学院，湖南 长沙410007)

    心肌缺血再灌注损伤 (myocardial ischermic reperfusion injure，MIRI) 的发病机制及防治是当今备受关注的热门课题，其中血管病变是缺血心肌病的根本原因。 栝楼薤白半夏汤 (Gualou Xiebai Banxia Decoction，GXBD) 出自张仲景的 《金匮要略》，是治疗胸痹的名方，此方现在多用于心血管疾病的治疗。 本课题前期实验结果显示GXBD 能保护内皮细胞、改善心肌细胞凋亡和对心肌细胞信号传导通路的介导以保护缺血再灌注损伤心肌[1-3]。 本文通过观察GXBD 对血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF) 蛋白与基因的表达、微血管密度(microvessel density，MVD)的影响，探讨此方防治MIRI 的新机制。

    1 材料

    1.1 动物

    3月龄雄性SD 大鼠50 只，体质量220～250 g。由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供，许可证号SCXK(湘)2013-0004，饲养于湖南中医药大学动物实验室，室内清洁，自然采光，通风良好。

    1.2 药物与试剂

    栝楼薤白半夏汤[4](栝楼30 g， 薤白15 g， 半夏10 g，白酒30 mL)。白酒购自市售的米酒头(酒精含量35%)。 7 剂药材按照文献[5]浓缩至含生药1 g/mL，共385 mL，4 ℃条件下保存备用。SYBR Green PCR 试剂盒、逆转录试剂盒：Thermo 公司产品；一抗Rabbitanti-VEGF(批号：12320)；Rabbit-anti-CD34；二抗通用型PV-9000Kit 试剂盒，均为武汉搏士德生物公司产品。

    1.3 仪器

    RWD407 型小动物人工呼吸机(深圳市瑞沃德生命科技有限公司)，MP150 型16 导生理记录仪(美国BIOPAC 公司)，EICADMLB2 型光学显微镜(中国上海第三分析仪器厂制造)，JY5002 型电子天平 (上海雷韵试验仪器制造有限公司)；PCR 仪器(德国Eppendorf 公司)；DYY-6C 电泳仪(北京六一仪器厂) ......