刘 余，谭达全，罗桂香，李定祥，尹 勇，郭春秀*

    (湖南中医药大学，湖南 长沙410208)

    应激性胃黏膜损伤是机体在遭受身体、心理障碍等应激状态时，发生的一种急性胃黏膜病变。 随着社会压力的不断增加，人们的心理障碍问题愈发严重，此病的发生率也成大幅上升势头，已严重危害人们的健康和生命。 现代研究证实胃黏膜细胞过度凋亡是应激性胃黏膜损伤发生的机制之一[1]。 虽然近年来有研究[2-4]证实半夏泻心汤能有效地预防应激性溃疡的发生，但是缺乏半夏泻心汤对胃黏膜细胞凋亡影响以抗应激性损伤的研究。 本实验拟通过对束缚水浸应激大鼠胃黏膜上皮细胞凋亡相关蛋白Bcl-2 家族和Caspase-3 表达的影响， 探讨半夏泻心汤预防应激性胃黏膜损伤的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料与仪器

    半夏泻心汤所用中药(半夏、黄芩、黄连、干姜、人参、炙甘草、大枣)均一次性购自湖南楚仁堂大药房。 药物剂量比例按《伤寒论》原著：半夏半升，黄芩、黄连、人参、炙甘草各三两，黄连一两，大枣十二枚，根据文献[5]换算为现代用量，半夏55.7 g，黄芩、干姜、人参、炙甘草各46.875 g，黄连15.625 g，大枣42 g。 药物水煎30 min，2 次，提取水煎液，合并， 水浴浓缩至含生药3.05 g/mL， 贮于冰箱中备用。 奥美拉唑， 北京康蒂尼药业有限公司生产，规格：20 mg/片， 实验时以生理盐水稀释成0.203 mg/mL 浓度。

    逆转录试剂盒(Fermentas)、 引物(上海生工公司)、 辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG(Proteintech)、Caspase-3 抗体、辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG(Proteintech)。 TS-92 摇床、QL-901 旋涡混合器(其林贝尔)、PCR 仪(Eppendorf)、电泳仪、水平琼脂糖电泳槽、DYCZ-40A 转膜仪(北京六一仪器厂)等。

    1.2 动物分组与给药

    健康SD 大鼠40 只，雄性，体质量180～220 g，购自湖南斯莱克景达生物有限责任公司，动物许可证号：SCXK(湘)2011-0003。 大鼠按随机数字表法随机分为4 组：空白组、模型组、中药组、西药组，每组10 只。 4 组动物于实验前饲养于湖南中医药大学动物实验中心， 控制室温(25±2)℃， 相对湿度(65±5)%，饲养条件相同。 动物适应性饲养1 周后，中药组给予半夏泻心汤药液30.5 g/kg 灌胃，1 次/d，持续3 d； 西药组给予奥美拉唑2.03×10-3g/kg 灌胃；空白组和模型组以等体积生理盐水灌胃处理 ......